Enzyme Activity Assay 결과레포트 [A+]

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목차

1. Abstract
2. Experiment
3. Result
4. Discussion
5. Reference

본문내용

1. Abstract
Enzyme activity assay는 pNPB 용액에 효소 calB를 넣은 후 용액을 반응시키고 10분 간격으로 총 4번, UV spectrophotometer를 사용하여 흡광도를 측정하는 실험이다. 이 때 pNPB 용액이 calB 하에서 분해되어 용액은 짙은 노란색으로 변해가며, 흡광도 값은 점점 커진다. 시간에 따른 흡광도 값을 그래프()로 그리고, 흡광도에 대한 농도 값을 계산하며 효소의 활성을 나타내는 를 계산한다.

2. Experiment
(1) 기구 및 시약
250ml
laboratory bottle
Micropipette
aluminium foil
Cuvette
UV spectrophotometer
Shaking incubator
표 1. 실험 기구

시약)
- Candida antarctica lipase B solution (calB) → 활성이 높기 때문에 흡광도 측정을 용이하게 하기 위하여 500배 희석하여 실험한다.
- 50mM p-nitrophenyl butyrate (pNPB)
- 50mM Tris-HCl buffer pH 7.5 → Tris-HCl buffer는 pH의 급격한 변화를 막기 위해 사용하는 완충 용액으로서, 이는 pH 값을 약 7.5로 유지시켜준다. 그리고 pH 7.5에서 효소 calB는 최대 활성을 가진다.
- DDW

참고 자료

Quantitive Chemical Analysis 9th edition,Daniel C. Harris,흡광도,475-478p
장호남 외 1인, 생물화학공학, 아카데미서적, 2002