핵산실험

소개글

"핵산실험"에 대한 내용입니다.

목차

1. 실험의 목적　　
2. 실험 원리
3. 배경지식 및 이론　
4.　실험기구　 및　시약
　5.실험방법
6. 실험의 결과
7. 토의

본문내용

1. 실험의 목적
효모를 이용해 효소를 추출하여 효소-기질의 반응을 살펴본 뒤, 이를 통해 Sucrose 추출 함을 알 수 있다.
베네딕트 정성시험으로 생성물을 확인해본 뒤, sucrose의 활성을 측정 할 수 있다.
효소 활성에 영향을 미치는 요인에 대해 알 수 있다.

2. 실험 원리
핵산은 염기，당，인산로 연결되어 있는 폴리 뉴클레오티드이다．이 실험은 당만을 추출하여 DAN，RAN 존재유무를 구분 짓기 위함이다． 그러므로 불필요한 염기와 인산을 제거하기 위해， 실험은 크게 TCA용액과 ９５％에탄올을 사용하였다． 핵산은 단백질과 함께 가지고 있기 때문에， 2.5%TCA사용하여 필요 없는 글리코겐을 제거하고， 지방，다당류등을 ９５％ 에탄올로 제거한다．１０％ TCA사용과 가열함으로서 단백질 변성을 촉진시킨다．총 원심분리를 ５번 통해 분리할 수 있다．
소간 속 핵산을 추출할려고 한다． 추출하는 것이기 때문에 칭량을 대략적으로 하여，증류수와 함께 넣어 균질화 한다． 도마와 칼로 잘게 썰어 준 다음， homogenize를 넣으면 추출이 빠르다．
우리가 사용하는 TCA용액은 ２.５，５，１０％이다． 이는 trichloroacetic acid로， 화학식 CCl3COOH으로 초산（CH3COOH） H에대신 염소가 들어간 염산이다． 농도가 가장 낮은 ２.５％ TCA는 글리코겐이 잘 추출된다． １차적으로 차가운 2.５％TCA를 사용하여 글리코겐을 추출한다．차게 하는 이유는 조직의 마지막을 여러 가지 효소가 있는데 핵산 가수분해 효소가 있기 때문에， 핵산이 분해되어 상등에 있을 수 있다． 효소는 ３０-４０도씨에 잘 활발한데， 효소의 활성을 정지시키기 위해 차가운 시약을 사용한다．
１０％TCA의 pH1-2의 강산을 넣으면 단백질이 변성이 된다．이후 가열에 의한 단백질이 변성이 되어 침전된다．
침전물에 ９５％ 에탄올을 넣는다． 한번더 원심분리를 하는데， 상등액에는 지방들이 완전한건 아니지만 나간다． 침전물에는 증류수와 １０％ TCA시약을 넣어준다． 침전물에는 거의 핵산과 단백질이 남아 있다．

참고 자료

[네이버 지식백과] 단백질의 합성 (통합논술 개념어 사전, 2007. 12. 15., 청서출판)