transformation과 MMS assay (spottiong assay, yeast knock out 트랜스포메이션 형질전환으로 knock out 유도 및 spotting assay (MMS)로 이를 확인한다.
- 최초 등록일
- 2020.11.11
- 최종 저작일
- 2019.11
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소개글
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목차
1. Title
2. Introduction
1) 유전자
2) Crispr cas9
3) Yeast transformation
4) Gene deletion by homologous recombination
5) Homologous recombination
6) MMS (Methyl methanesulfonate)
3. Materials & Methods
1) Materials
2) Methods
4. Results
5. Discussion
6. Reference
본문내용
1. Title: Yeast를 transformation하여 RFA1의 deletion을 유도하고 이 결과를 spotting assay(MMS이용)를 통해 phenotype으로 관찰하여 transformation 되었는지 확인할 수 있다.
2. Introduction
● 유전자
어떠한 생명체에 기본적으로 존재하지 않는 유전자(혹은 DNA 서열)을 도입함으로서, 여러 특징이 나타날 수 있다. (ex 기본적으로 단당류만 이용이 가능한 효모에 BGL2 같은 유전자를 넣게 되면 탄수화물 혹은 다당류에 해당하는 탄소원을 이용할 수 있게 된다.)
실험 디자인에 따라 외래 유전자를 발현시킬 수도, 내부 유전자를 없앨 수도, 혹은 변이를 일으킬 수 있는데 유전자가 들어가는 Host가 박테리아, 효모, 식물, 동물 어떤 것인지에 따라 부르는 명칭이 다르다 (transformation, transfection, etc.)
Biology 분야의 실험 초기에는 plasmid DNA를 이용한 cloning이 거의 주를 이루었지만, 곧이어 DNA fragment를 직접 도입하는 방법도 같이 사용되었으며 최근에 연구되어지는 CRISPR 기법도 결국 유전물질을 도입함으로서 세포 내에 변이를 일으키는 데 편의성과 효율, 정확도를 높이는 쪽으로 발전이 이루어지고 있는 것이다.
참고 자료
https://en.widipedia.org
https://www.sci.sdsu.edu
