생물학실험 보고서 (2)

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목차

1. Introduction

2. Materials and Methods
2.1. 대장균 형질전환과 클로닝
2.2. Colony PCR
2.3. PCR 결과 및 제한효소 확인

3. Results
3.1. 대장균 형질전환과 클로닝
3.2. Colony PCR 및 제한효소 처리 결과

4. Discussion
4.1. 대장균 형질전환과 클로닝
4.2. Colony PCR
4.3. PCR 결과 및 제한효소 확인

References

본문내용

Abstract
생명공학 기술 중에서도 DNA 기술은 서로 다른 유전자를 구별하거나 특정 단백질을 대량으로 생산하는 등 많은 응용분야를 가진다. 따라서 이번 실험에서는 DNA cloning, PCR, 제한효소 처리한 DNA의 젤 전기영동 실험을 통해 DNA 복제 및 분석 방법을 익혀 현대 DNA 기술을 이해하는 것을 목표로 하였다. plasmid DNA를 vector로 삼아 대장균을 유전자 A, B, C로 형질전환시키고, colony PCR 및 전기영동을 이용해 그 결과를 RFLP 패턴으로 확인한 결과, 다른 유전자를 가진 DNA에서 서로 다른 패턴이 나타나는 것을 확인할 수 있었다. 이를 바탕으로 unknown DNA #1, #2에 어떤 유전자가 포함되어있는지 유추할 수 있었다.

1. Introduction
현대 DNA 기술은 특정 유전자를 대량으로 복제하고 분석하여 개인의 유전자를 식별하거나 원하는 형질을 가진 미생물을 대량 배양하는 등 다양한 분야에 응용되고 있다. 특히 DNA cloning은 원하는 유전자를 포함한 plasmid vector를 박테리아에 삽입해 배양한 후, 형질전환(transformation)이 일어난 박테리아만을 선별하여 해당 형질을 응용할 수 있게 하는 기술이다. 형질전환이란 다른 생물의 DNA가 숙주 세포 내에 유입되어 새로운 형질을 갖게 되는 것이다. 인위적으로 형질전환을 일으킬 때는, chromosomal DNA와는 독립적으로 복제되는 plasmid DNA에 제한효소(restriction enzyme)를 사용해 MCS(multiple cloning site)에 원하는 DNA를 재조합시킨다. 이 plasmid를 숙주 세포에 삽입하여 형질전환이 성공적으로 일어나면 숙주 세포에서 외부 DNA가 발현되어 새로운 형질을 가지게 된다[4, 5]. 이때 배양한 숙주 세포 중 형질전환이 일어난 세포만을 선별해야 하는데, 대표적인 선별 방법으로는 항생제 저항성을 이용하는 방법과

참고 자료

Aaij C, Borst P. The gel electrophoresis of DNA. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Nucleic Acids and Protein Synthesis. 269 (2): 192–200. (1972).
Birnboim, H. C., & Doly, J. A rapid alkaline extraction procedure for screening recombinant plasmid DNA. Nucleic acids research, 7(6), 1513–1523. https://doi.org/10.1093/nar/7.6.1513 (1979).
Dündar, Munis, et al. Current Applications of Biotechnology. Erciyes University. 12-14, 334. 15(2015).
Sadava, D. E., Hillis, D. M., Heller, H. C., & Berenbaum, M. Life: The science of biology (9th ed). Sunderland, MA: Sinauer. 286-287, 324-326, 389-391, 397-398 (2014).
Sambrook, Joseph, et al. Molecular Cloning: a Laboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory Press. 11-12, 159-160 (2012).
Zimm BH, Levene SD. Problems and prospects in the theory of gel electrophoresis of DNA (PDF). Quarterly Reviews of Biophysics. 25 (2): 171–204. (1992)