전기영동 결과보고서

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전기영동 결과레포트입니다
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목차

1. Title
2. Date
3. Purpose
4. Theory
5. Material
6. Procedure
7. Result
8. Discussion
9. Reference

본문내용

1. Title : 제한효소 처리와 크기와 구조가 다른 DNA 전기영동
2. Date : 2019년 11월 26일(실험날짜), 2019년 11월 28일(작성날짜)
3. Purpose : 제한효소를 처리하여 plasmid DNA를 자르고, 젤 전기영동을 하여 크기와 구조에 따라 분리한다.
4. Theory
* psiCHECK-1 및 psiCHECK-2 vector는 RNA간섭(RNAi)의 초기 최적화를 위한 정량적이고 빠른 접근법을 제공하도록 설계되었다. vector는 reporter gene에 융합 된 targe gene의 발현 변화를 모니터링 할 수 있게 한다. 두 vector에서 Renilla luciferase는 1차 reporter gene로 사용되며, gene of interest(보고자하는 유전자)는 Renilla translational stop codon의 하류에 위치한 다중 클로닝 영역으로 클로닝 된다. gene of interest(보고자하는 유전자)에 대한 합성 siRNA 또는 생체 내 발현 된 shRNA에 의한 RNAi 과정의 개시는 핵융합 mRNA의 분할과 후속 분해로 이어진다. Renilla 활동의 감소를 측정하면 RNAi 효과를 편리하게 모니터링 할 수 있다. psiCHECK-2 vector는 두 번째 reporter gene인 firefly luciferase를 함유하고 종말점 용해 분석(endpoint lytic assays)을 위해 설계되었다. psiCHECK-2 벡터에 firefly luciferase의 도입은 firefly luciferase 발현의 표준화를 가능하게 하여 강력하고 재현 가능한 결과를 낸다.
→이번 실험에 쓰인 psiCHECK-2 벡터는 XhoⅠ과 NotⅠ사이에 임의의 fragment를 집어 넣어준 상태이다.

* 1kb DNA Ladder : 1 kb DNA Ladder (-dye)의 size range는 0.5 ~ 10 Kb로써, 이 범위 내에 해당되는..

<중 략>

참고 자료

https://www.bioneer.co.kr/20-d-1042.html
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=1174460&cid=40942&categoryId=32822
https://terms.naver.com/entry.nhn?docId=609415&cid=50314&categoryId=50314
유전자 클로닝과 DNA분석/T. A. Brown/월드사이언스/chapter3~4
Modification of gel architecture and TBE/TAE buffer composition to minimize heating during agarose gel electrophoresis/Brian A. Sanderson/2014