Bradford assay 방법 - 단백질 정량 분석 실험 보고서

소개글

Bradford Assay Method를 통하여 단백질의 양을 정량하는 실험

목차

1. 실험목적

2. 이론 및 원리
1) 단백질의 정량법
2) Lambert Beer의 법칙

3. 시약 및 기구

4. 실험방법

5. 결과

6. 고찰

7. 참고문헌

본문내용

1. 실험 목적
Bradford Method를 통하여 단백질의 양을 정량한다.

2. 이론 및 원리
1. 단백질의 정량법
1) Bradford assay 방법
이 실험에서 사용된 Bradford 방법은 실험방법이 빠를 뿐 아니라 비단백질 성분들에 의한 방해도 거의 없다. 이 방법은 발색반응이 2분 이내에 완결되며 1시간 까지 안정성이 유지된다. Bradford 방법의 감도는 Lowly 방법보다 좋으며, 미량 정량법을 사용하면 1~20μm의 단백질을 측정할 수 있다. Coomassie brilliant blue 염료 사용 시에는 phosphoric acid, methanol의 혼합물로 된 것을 사용한다. 사용 전에 이 염료 시약을 증류수로 5배 희석하여 여과한 후 유리용기에 담아 실온에서 보관한다. 이 희석용액은 2주간 안정하다.

그림 1 Coomassie brilliant blue G-250

산성용액에서 Coomassie brilliant blue 염료(그림 1)는 단백질의 arg, trp, tyr, his, phe에 결합하게 되고, 이로 인해 염료의 최대 흡광도는 465nm에서 595nm로 이동하게 된다.

참고 자료

식품가공학
한국생화학회, 실험생화학 / pp53-64, pp197-206, 탐구당, 2004
식품과 조리원리 / 이주희,김미리, 민혜선, 송은송, 권순자, 김미정, 송효남
고급영양학 / 변기원,이보경,권종숙, 김경민, 김숙희 지음 / 교문사.