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면역 침강법 immunoprecipitation

하닝이
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최초 등록일
2021.06.01
최종 저작일
2020.06
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목차

1. 실험 목적 및 원리
2. 실험재료
3. 실험방법
4. 실험 목적 및 원리
5. 실험재료
6. 실험 결과

본문내용

실험 목적 및 원리
세포를 배양하여 살아있는 세포와 죽은세포의 counting을 통해서 세포의 생존률을 계산한다.

실험재료
cell, medium, PBS, 1%Trypsin-EDTA, 15ml tube, culture dish, pipette, 6well
10ul tripan blue, Hemocytometer,현미경

실험방법
1. 소독을 완벽히 처리한 상태에서 기구를 준비한다.
2. media에 labeling한다.( 10% FBS와 antibiotics를 넣을 것) 날짜를 기입한다. FBS50ml 10%를 넣어줄것이므로 media 50ml을 덜고 FBS를 media에 넣어준다. antibiotics는 1% 5ml넣어준다. 이때 pipet aid로 넣어주고 흔들어서 섞는다.
3.HEK 293 T cell을 incubator에서 가져오고 10cm dish에 있는 것을 사용하는데 기울여서 suction 한다. PBS를 사용하여 wash 하고 다시 기울여서 suction한 후 pipet aid로 Trpsin을 넣어준다. 1ml를 dish에 천천히 sjRrh 기울여서 전체적으로 펴지도록 한다.
4. cell 이 떨어지는 동안 cell counting에 필요한 물품을 준비하고 cell떨어뜨려서 잠시 보관할 15mltube를 준비한다. 떨어진 세포는 counting을 위해 옮긴다.
5. 만들었던 media 4ml을 집어넣고 분주한다.

참고 자료

없음
하닝이
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