HPLC fractionation

소개글

"HPLC fractionation"에 대한 내용입니다.

목차

1. Sμbject 실험 제목

2. Object 실험 목표

3. Principle & Discussion 실험 원리 및 고찰
1) 크로마토그래피 분리의 평가
2) HPLC (High Performance Liquid Chromatography)
3) 2D-Chromatography
4) Acetonitrile
5) High pH Reverse-Phase Chromatography Fractionation (hpRP)

4. Procedure 실험 방법

본문내용

1. Sμbject 실험 제목
:　HPLC fractionation

3. Object 실험 목표
: 널리 이용되는 HPLC의 기본 원리를 이해하고 high pH에서의 HPLC를 실험한다.

4. Principle & Discussion 실험 원리 및 고찰
1) 크로마토그래피 분리의 평가

(1) 분리능
: 2개의 접근한 peak의 분리의 정도를 나타내기 위하여 분리계수 및 분리도를 다음과 같이 정량적으로 정의하여 사용한다.

<중 략>

2) HPLC (High Performance Liquid Chromatography)

(1) LC
: Liquid chromatography (LC)는 용매에 용해되는 이온이나 분자를 분리하는데 사용되는 chromatographic 분석기법 중의 하나이다. 시료 용액이 고체나 액체 상의 다른 물질과 만나게 되면, 흡착, 이온교환, 분배 또는 크기 등 상호작용을 일으키게 된다. 시료성분 중의 각기 상이한 특성을 지닌 혼합성분들은 분리관 내에서의 이러한 상호작용에 의해 일정한 분리현상이 나타나게 된다.

(2) HPLC
HPLC는 혼합용액 중의 구성성분을 분리하기 위한 LC의 하나이다. HPLC는 High Performance Liquid Chromatography의 약자로써 고성능액체크로마토그래피(HPLC)라고 한다. 보통의 액체크로마토그래피에서 입자를 더욱 작게 하고, 가는 분리관을 사용해서 알맞은 압력을 가하여(입자를 작게 하면 액체의 통과가 느려지므로) 용매를 흘리면, 기체크로마토그래피와 같은 속도로, 뛰어난 분리 기능을 얻을 수 있다. mobile phase reservoir, pump, injector, separation column, detector로 구성된다. 펌프에 의해 컬럼에 주입된 혼합물 중의 성분들은 컬럼을 통과하는 동안 고정상과 이동상 간의 분배계수의 차이에 의해 일정한 띠를 형성하며 각 성분 별로 분리된다.

참고 자료

[nacalai tesque] 이동상은 어떻게 조정하는가?　/ https://www.nacalai.co.jp/global/cosmosil_kr/FAQ/Q5-Q7.html / 2021-05-18
[Proteomics Hyoungjoo] C18 Spin-Column 으로 High pH Reverse-Phase chromatography Fractionation 하는 법 / https://proteomicstechnology.tistory.com/81 / 2021-05-18
Feng Yang, Yufeng Shen, David G. Camp, II / High pH reversed-phase chromatography with fraction concatenation as an alternative to strong-cation exchange chromatography for two-dimensional proteomic analysis / Expert Rev Proteomics. 2012;9(2):129-34