중앙대학교 chromosome sister chromatid exchange (SCE) 확인 A+ 결과레포트
- 최초 등록일
- 2021.12.15
- 최종 저작일
- 2021.09
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목차
1. Subject
2. Object
3. Introduction
4. Method
5. Result
6. Discussion
7. Reference
본문내용
1. Subject: chromosome sister chromatid exchange (SCE) 확인
2. Object: SCE가 어떤 상황에서 발생하는지 알아보고, 현미경으로 관찰 시, SCE빈도를 BrdU와 Acrydine orange를 이용해서 어떻게 알아낼 수 있는지를 공부해본다.
3. Introduction
(1) Sister chromatid exchange (SCE)
① S phase에 DNA 복제가 일어나며 SCE 발생
② 복제된 두 DNA strand가 절단 -> DNA duplex 전체가 교환됨
③ 유전 정보는 SCE 발생 후에도 동일
(2) SCE 확인
① bromodeoxyuridine (BrdU) 이용
② DNA 합성 중 Thymidine 대신 DNA에 incorporation 됨
③ BrdU 처리 후, 2번의 cell cycle이 진행되면 SCE 관찰이 가능함
④ BrdU : acrydine orange를 처리하여 UV를 쬐어주면 발광함. 이 때 BrdU가 있는 부분은 빛이 quenching되어 검게 보임
4. Method
(1) Cell culture
① HeLa cell에 BrdU 처리 - 48hr
② media suction
- Trypsin 작용을 억제하기 위해 버리지 않고 사용하기도 함
③ PBS로 washing(cell에 damage 안 주도록 함)
④ Trypsin 1㎖ 처리(붙어 있는 cell을 떼어주기 위함)
⑤ cell을 떼기 위해 37℃에 약 5분 incubation(손으로 탁탁 쳐주기도 함)
⑥ Trypsin 작용 억제 위해 serum 들어간 media를 넣어줌
참고 자료
https://www.sciencedirect.com/topics/biochemistry-genetics-and-molecular-biology/bloom-syndrome
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2695993/
https://www.nature.com/articles/nrm.2017.48
https://www.researchgate.net/publication/323919195_Place_of_the_genotoxicity_in_the_ecotoxicology_domain/figures?lo=1&utm_source=google&utm_medium=organic
https://en.wikipedia.org/wiki/Acridine_orange
