생화학실험 Tyrosinase 활성 측정 고찰

소개글

생화학실험 Tyrosinase 활성 측정 실험 고찰입니다.

목차

1. 시약 및 기구
2. 실험 방법
3. 고찰

본문내용

3. 시약 및 기구 :
• Tyrosinase 128 kDa
• L-Dopa 197.1879g/mol
• 0.1M Sodium phosphate buffer (pH 6.8)
• E.P tube
• 96 well plate

4. 실험 방법
4-1. Tyrosinase 제조 (제조 후 on ice 할 것! 희석 시, pH6.8 50mM Sodium Phosphate를 사용)
① 고농도 stock을 사용하여 100 U/µL tyrosinase solution을 500 µL제조.
4-2. Tyrosinase 활성 측정
① 96well plate에 다음과 같이 용액을 넣는다.

< 중 략 >

5. 고찰
Tyrosinase 활성 측정 실험으로 멜라닌 생성에 주요한 역할을 하는 효소인 tyrosinase의 기질 L-Dopa의 농도에 따른 활성을 측정하여 Km을 구해보았다. 효소는 생체내의 화학반 응을 매개하는 단백질 촉매으로 효소단위는 IU으로 효소가 최적조건하에서 분당 1µmol 의 기질을 생성물로 변환시키는데 필요한 효소량이다. 이번 실험에서는 효소의 여러 종 류 중 산화환원효소에 대해 실험을 하였다. 효소의 작용에 영향을 미치는 요인으로는 온 도, pH, 기질의 농도, 효소의 농도, 저해제 등이 있다. 효소 활성을 측정하는 것이 이번 실험에서 효소의 활성을 측정하는데 효소활성은 반응속도이므로 활성측정은 효소반응의 속도를 측정하는 것이다.

참고 자료

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