세포배양시험 표준작업지시서

소개글

세포배양시험 표준작업지시서

목차

1. 개요

2. 목적

3. 용어 정의

4. 시험법 준비사항
1) 시약 및 시험기구
2) 세포 배양
3) 시약 조제

5. 세포 수 측정
1) Dish에서 세포 분리 및 계수

6. 첨부양식

본문내용

1. 개요
본 시험법은 Raw 264.7 세포를 이용하여 세포배양을 하는 시험이다.

2. 목적
본 문서는 Raw 264.7의 세포 배양 및 세포수를 측정하기 위해 기술한 것이다.

3. 용어 정의
(1) Raw 264.7: Abelson murine 백혈병 바이러스에서 유도된 수컷 mouse의 종양에서 확립된 대식세포 세포주이다.

4. 시험법 준비사항
4.1 시약 및 시험기구

<중 략>

4.3. 시약 조제
(1) 100ml Penicillin/Stereptomycin을 37℃ 항온수조에서 빠르게 녹인 후, 클린벤치에서 10ml palcon tube에 5ml씩 소분한다. 소분 완료 후 sealing을 해준 뒤 시약 이름, 보관 날짜를 작성하여 냉동실에 보관하고 1개씩 녹여 사용한다.
(2) 500ml FBS를 37℃ 항온수조에서 빠르게 녹인 뒤 56℃로 설정된 항온수조에 30분간 넣고, 10분 간격으로 흔들어주어 inactivation 과정을 거친 후, 클린벤치에서 50ml palcontube에 50ml씩 소분한다. 소분완료 후 sealing을 해준 뒤 시약 이름, 보관 날짜를 작성하여 냉동실에 보관하고 1개씩 녹여 사용한다.
(3) 냉동실에서 6.2.3의 (1),(2)시약과 냉장실에서 DMEM을 꺼내 37℃ 항온수조에 빠르게 녹인 후, 클린벤치에서 DMEM에 FBS 50ml, P/S 100ml를 넣어준다. 조제 완료 된 DMEM 배지에 조제일자, 들어간 시약 종류 및 퍼센트를 기입하고 보관한다.

참고 자료

없음