[생명공학실험] 미생물에서 plasmid DNA 분리

목차

1. 실험 목적
2. 실험 원리
* 플라스미드
* Minipreps of plasmid DNA
*Plasmid DNA 분리법에는 여러 가지가 있으나 공통적인 세 단계
* plasmid minipreparation에 사용하는 용액의 성질
3. 실험 방법
4. 참고 문헌

본문내용

1. 실험 목적
형질전환된 bacteria로부터 plasmid DNA를 분리하는 것은 recombinant DNA를 제조하기 위한 첫
번째 단계이다. 분리된 plasmid DNA는 다음과 같은 용도에 사용된다.
1) Cloning genes
2) mutagenesis
3) nucleic acid hybridization을 위한 probe 제작

2. 실험 원리
* 플라스미드

: 플라스미드에는 약제에 대한 저항성을 가진 내성인자(R인자), 세균의 자웅을 결정하는 성결정인자
(F인자) 등이 발견되고 있다. 세균의 생존에 플라스미드의 존재가 필수적인 것이 아니며, 또 플라스미
드는 다른 종의 세포 내에도 전달된다. 근래 플라스미드는 그 특성을 이용해서 유전자공학에 이용될
가능성이 있어서 크게 주목되고 있다. 세균 내의 플라스미드를 세포 밖으로 빼내고 제한효소로
고리를 끊은 뒤, 가령 사람의 인슐린을 만드는 데 관여하는 DNA 조각을 이에 끼워 맞춰 다시 세균의
세포 내로 돌려보내 넣어주면 이종의 DNA 조각을 가진 잡종 플라스미드는 정상적으로 증식하고
세균이 분열할 때마다 인슐린을 생성하게 된다. 이와 같이 플라스미드에 끼워 맞출 수 있는 DNA는
그 근본이 고등생물인 진핵세포의 것으로도 가능하기 때문에 사람이 생성하는 인슐린․인터페론
․생장호르몬 등을 합성하는 데 책임이 있는 DNA를 이용해서 잡종 플라스미드를 만들 수가 있다.
이와 같은 과정을 유전자재조합 DNA라고 한다.

참고 자료

없음