[생물공정실험] 1주차 Mammalian suspension cell culture 결과보고서

목차

1. 실험방법
2. 실험결과 및 해석
3. 고찰
4. 참고문헌

본문내용

이번 실험에서는 suspension한 EGFP 유전자 발현 또는 비발현한 세포의 수와 viablity를 hemocytometer를 이용해 측정했다. 이때 EGFP 유전자가 발현 또는 발현되지 않게 조절하 는 방법은 CRISPR-CAS9을 이용해 casette를 construct한다. 즉 EGFP 유전자를 발현시키려면 promoter 유전자가 존재해야하고, 발현시키지 않으려면 promoter 유전자를 제거해줘야한다. 이번 실험에서는 CHO cell, 특히 suspension culture가 가능한 CHO-S cell을 사용했다. 이 cell은 부유하면서 자랄 수 있어 배양속도와 공간 활용도가 adherent cell에 비해 좋아 생산 성이 높으므로 산업적으로 잘 쓰인다. 또한 인간이랑 진화적으로 가까워 human-like PTM, glycosylation, folding을 가지므로 비교적 원하는 quality의 항체를 얻을 수 있으며 바이러스 에 강하다. 실험방법으로는 먼저 동물세포의 viability를 알고 동시에 희석시키기위해 trypan blue dye exclusion을 사용했다.

참고 자료

Thermofisher Scientific – CHO cell
manual