[생물학실험] Western blot SDS-PAGE를 이용한 단백질의 정제

소개글

자연과학분야 특히 생물학, 생물공학을 공부하는 학생에게 추천

목차

Introduction
Materials & Method
Results
Discussion
References

본문내용

1. Introduction

전기 영동 기술은 생체 용액에 있는 개개의 단백질 성분을 분리하는데 기본적인 기술이다. 종이나 전분(starch), agarose등이 단단하고, 반응성이 없으며, 대류성이 없어서 전기 영동 기술에 많이 이용되었으나 현재는 polyacrylamide가 전기 영동의 대부분에 이용되고 있다. 그러나 이 재료의 우수성만으로는 특정 단백질의 검출에는 이용할 수 없다. 1979년 Towbin은 전기영동 시킨 polyacrylamide gel로부터 무수한 구멍이 있는 nitrocellulose membrane으로 단백질을 이동시켜 단백질의 항체 검출하는 방법을 고안하였다.

Blotting은 SDS-PAGE에 의해 분리된 단백질들을 모세관 작용 혹은 전기 영동상에 의해 분리젤로부터 지지막(supporting membrane)으로 옮기는 과정을 말한다. 이렇게 하면 gel 내에서 분리되어 있던 거대 분자가 막에 이동되어 똑같은 복제판(replica)을 가지는 지지막을 얻을 수 있다. 이렇게 옮기는 과정 동안 단백질로부터 SDS&#4<font color=aaaaff>..</font>

참고 자료

․ Geoffrey M.Cooper, The Cell : pp. 509-515
․ Rodney F. Boyer. Modern Experimental Biochemistry.
․ Harlow, E. and Lane, D. (1988). Antibodies: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor, NY: 471-510.