[분석화학실험7] HPLC를 이용한 뇨중의 caffeine 분석

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목차

Ⅰ. 실험 목적과 원리
1. 목적
2. 원리

Ⅱ. 시약과 기구
1. 시약
2. 기구

Ⅲ. 실험과정
1. 검량선 작성을 위한 표준품 준비
2. 뇨 중 배출된 카페인 분석

Ⅳ. 결과
1. 6개의 표준 농도 분석 결과 이용하여 calibration curve 작성
2. Calibration curve와 시료 분석 값을 대입하여 caffeine 농도 계산

Ⅴ. 고찰
1. 실험 과정에 대한 고찰
2. 실험 결과에 대한 고찰
3. 수포화 에테르(water-saturated ether)를 사용하는 이유

본문내용

1. 목적
생체시료인 뇨 중의 카페인 농도를 분석한다. 분석기기는 HPLC보다 더 높은 압력과 분 리도를 갖는 UPLC를 사용한다. 저번주 실험에서 사용한 자양강장음료와 달리 생체시 료는 전처리 과정이 필요하므로 액상추출법을 진행한다.

2. 원리
생체시료 분석
- 생체시료란 사람 또는 동물로부터 분리 가능한 검체이다. 생체 시료의 예시로 는 전혈 (whole blood), 혈청 (serum), 혈장 (plasma), 소변 (urine), 타액 (saliva), 체액 (biological fluid), 분변 (feces), 조직 (tissue) 등이 있다.
- Target compound
내인성 물질 (Endogenous compounds)이란 생체 시료 자체를 구성하는 생체 분자를 말한다. 신약개발 과정 중 후보물질 선정, 전임상 시험, 임상 시험 단계에서 생체시료 분석방법이 활용된다.
외인성 물질 (Exogenous compounds)이란 의약품이나 독성물질 등 외부 요인을 말한다. 제네릭 의약품의 생물학적동등성 시험, 도핑테스트 및 마 약류 복용 여부 검사, 법의학 분야 등에서 응용된다.
- 생체시료 분석이 일반 의약품 분석보다 어려운 이유
본 실험에서 사용하는 생체시료 Urine(뇨)의 구성은 물이 99%를 차지하고 그 외에 요소, 요산, 아미노산, Na, K, Mg, Vitamin이 있다. 이렇듯 생체시료 내에는 여러 물질이 혼재해 있으며 이들의 영향을 Matrix effect라고 한다. 시료에 존재하는 분석 성분이 아닌 물질들이나 기타 방해 인자로 인해 직 · 간접적으로 주반응이 변경되거 나 방해 받을 수 있다. 따라서 생체시료 분석은 일반 의약품 분석보다 어렵다.
- 생체시료의 전처리 방법
단백질 침전법 (Protein precipitation)
산, 중금속, 유기용매 등을 첨가하여 생체시료 중 단백질의 3차원 구조를 변형시켜 침전반응을 유도하는 방법이다.

참고 자료

https://www.scienceall.com/에틸에테르ethyl-ether/