[생화학실험] (A+) Plasmid DNA isolation and characterization by electrophoresis

소개글

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목차

1. Title

2. Purpose

3. Theory

4. Apparatus & Reagent
1) Growth of Bacteria
2) Isolation of Plasmid DNA

5. Procedure
1) Procedure Introduction to LB-agar plate
2) Colony culture
3) Extraction of plasmid DNA
4) Restrict digestion

6. Results

7. Discussion

본문내용

DNA(Deoxyribo Nucleic Acid)는 뉴클레오타이드의 중합체인 두 개의 긴 가닥이 서로 꼬여있는 이중나선 구조로 되어있는 고분자화합물이다. DNA는 4종류의 뉴클레오타이드가 중합 과정을 통해 연결된 가닥으로 이루어져 있다. 이 가닥은 Cytosine, Guanine, Adenine, Thymine은 독특한 핵염기(nucleobase)로 구분되기 때문에 흔히 DNA 염기서열이라고 부른다. DNA 염기서열은 유전정보를 나타내는 유전자 구간과 그렇지 않은 비부호화 DNA 구간으로 나눌 수 있다. 과거에 기능을 가진 유전자였더라도 돌연변이를 통해 기능을 상실한 슈도진이 되면 비부호화 DNA가 된다. DNA는 스스로를 복제하고 유전정보를 통해 유전자 발현이 일어나게 한다. 유전자는 DNA 사슬의 특정 구간으로 실제 단백질 형성과 같은 발현에 관여하는 엑손 구간과 그렇지 않은 인트론을 포함한다. DNA가 직접 유전자 발현을 실행하는 것은 아니며 실제 발현 과정은 DNA에서 전사된 전령 RNA(mRNA)가 지닌 코돈에 의해 진행된다. 코돈은 세 개의 염기서열이 묶인 유전단위로 시작 코돈과 종결 코돈 그리고 그 사이에 실제 아미노산 결합을 지시하는 코돈들로 이루어져 있다. mRNA는 리보솜에서 효소와 같은 단백질을 합성하게 한다.

재조합 DNA(Recombinant DNA)는 유전공학에 의해 인위적으로 재조합된 DNA이다. 흔히 유전자 변형 또는 유전자 조작이라고 불리는 재조합 DNA 기술은 특정한 유전형질을 갖는 유전자를 삽입하거나 제거하는 조작을 통해 새로운 재조합 DNA를 만드는 과정이다. 재조합 DNA를 생성하는 방법은 다음과 같은 방법을 통해 이루어진다.

• DNA의 절단: 제한효소는 DNA 염기서열의 특정한 위치에서 작용하여 DNA를 잘라낸다.
• DNA의 분리: 잘라낸 DNA는 겔 전기 영동법을 사용하여 분리할 수 있다.

참고 자료

Wikipedia, DNA
Wikipedia, 재조합 DNA
Wikipedia, 제한 효소
Wikipedia, DNA 연결효소
Wikipedia, 플라스미드
Wikipedia, Sodium chloride
Wikipedia, Sodium hydroxide
Wikipedia, Ampicillin
Wikipedia, Chloramphenicol
Wikipedia, Ethanol
sigmaaldrich, Tris hydrochloride
Wikipedia, EDTA
Wikipedia, Triton X-100
Wikipedia, Glucose
Wikipedia, Potassium acetate
Wikipedia, Acetone
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Wikipedia, Ethidium Bromide
Wikipedia, Glycerol
Wikipedia, Bromophenol blue
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