Protein Overexpression in E.coli

목차

■ 실험 날짜
■ 제 출 자
■ 실험 목적
■ Theory
■ Apparatus & Reagent
■ Procedure
■ Data & Result
■ Reference

본문내용

■ 실험 목적
IPTG를 이용한 E.coli 의 단백질 Overexpression을 electrophoresis를 통해 확인한다.

■ Theory
- lac operon Regulation
prokaryote에서 발견되는 operon 은 보통 하나의 대사과정에 필요한 여러 가지 단백질을 코딩하는 Gene 이다. 대표적인 operon이 바로 옆에서 보이는 lac operon 인데 이것은 3가지의 효소를 코딩하는 Gene 이다. 먼저 promotor 부분에는 RNA polymerase 가 붙어서 Transcroption을 준비 하고 있다. 하지만 operator 부분에 repressor 가 붙어 있기 때문에 폴리머 래이즈는 앞으로 진행을 할 수가 없다 ( lac operon turn off)
이 repressor 부분에 만일 Lactose가 붙게 되면 Repressor는 떨어져 나오게 되고 폴리머래이즈가 앞으로 진행하여 RNA를 만들게 된다. ( lac turn on )

참고 자료

- Biology of microorganism , Brook. 9판 p139 ~ 141
- Molecular Cloning(2001) 3rd edition. Sambrook & Russell, chapter 9 cold spring harbor laboratory Press