Gel extraction 예비레포트 결과레포트

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목차

1.실험 제목
2.실험 날짜
3.실험 목표
4.실험 이론
5.시약 및 기구
6.실험방법
7.예상결과
8.참고사항
9.참고문헌

본문내용

1. 실험 제목
Gel Extraction
2. 실험 날짜
3. 실험 목표
- 전기영동한 Gel로부터 원하는 DNA를 추출하기 위해 Gel Purification Kit을 이용하여 DNA를 정제한다.
4. 실험 이론
4.1. Gel Extraction
전기영동 후 아가로스 겔로부터 원하는 DNA 조각을 분리하는데 사용되는 기술이다. 이 방법은 재조합 DNA를 만들 때 중요하게 쓰이는 기술이므로 회수율이 높고 용출된 DNA의 순수도가 보다 높고, 또한 빠르고 간편하게 실행할 수 있는 방법이다.
4.2. 전기 영동
전기영동은 주로 생체 고분자들의 성질을 연구하고, 그것들을 분석, 분리, 정제하는 중요한 방법중에 하나이다. 전기영동은 DNA, RNA나 단백질 같은 것들이 고유의 전하를 띠고 있고, 그것들이 어떤 전기장에 놓이게 되면 이동할 수 있다는 사실을 기본으로 하고 있다. DNA 전기영동은 크기, 전하 또는 구조가 다른 DNA 조각을 분리하는 기본적인 방법 입니다. DNA는 구조상 Backbone의 Phosphate group을 가지고 있어 전기영동에 사용되는 Buffer안에서 음전하를 띄고 있으며 두 전극 사이에 위치했을 때 (+)극으로 움직이는 기본적인 원리를 가지고
있습니다. 이때, Agarose나 Polyacrylamide와 같은 Gel Matrix 사이를 DNA 분자가 통과하는 속도는 분자량이 커질수록, Gel의 농도가 높을 수록 늦어지게 됩니다.
4.3. Agarose gel
한천에서 유래된 나선형의 아가로오스(agarose) 분자가 여러 번 꼬여있는 형태로 뭉쳐서 겔 형태로 굳어 있으며, 생체 분자가 통과할 수 있는 통로와 구멍이 있는 입체적 구조이다. 이러한 고체 형태의 3차원 구조는 수소결합을 통해 이루어지며, 열에 의해 다시 액체 형태로 돌아간다. 녹는점은 겔이 형성되는 조건에 따라 조금씩 다르지만 대부분 85~95°C에서 이루어지며, 고체가 되는 온도는 35~42°C 사이이다.
아가로스 겔은 내부의 크고 작은 구멍들이 있고 유연하면서 단단한 구조를 이루고 있기 때문에, DNA나 단백질과 같은 큰 분자들이 전기영동을 통해 이동하는 데에 유용하다. 구멍의 크기는 아가로스 겔의 농도에 따라 조절될 수 있다.

참고 자료

화학대사전
위키백과
한국과학 KOREA SCIENTIFICS
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분석장비 이야기, “[분석장비 Anatomy] 나도드롭 (Nano Drop) 미량 분광광도계를 마주하며...”, bric 동향, 2020.01.30., https://www.ibric.org/myboard/read.php?Board=news&id=313595.
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