7주차_단백질정제

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목차

1. Result
2. Discussion
3. Further Study
4. References

본문내용

① Ni-NTA agarose 수지를 이용한 단백질 정제
② 6x-His tagged protein을 Ni-NTA agarose 수지를 이용, chromatography를 통해 정제할 수 있다.
③ Result
▲ Washing buffer 추가 후 ▲ elution fraction
◀ SDS PAGE 결과
-우리 조의 실험 결과에서 가장 두꺼운 band의 size는 약 70kDa로 이 단백질이 실험에서 정제하고자 한 단백질이다. 예측했던 size는 75kDa인데 이보다 조금 작은 단백질 size가 관찰되었다.
④ Discussion
-1조의 경우 다른 조들에 비해 모든 band의 굵기가 얇고 흐리게 나온 것으로 보아 단백질의 loading이 적게 되었을 것이라 생각하였다.

참고 자료

Michael M.Cox, Jennifer A.Doudna, Michael O’Donnell - Molecular Biology_ Principles and Practice-W.H.Freeman & Company (2015), Ch.7
Jeremy M. Berg, John L. Tymoczko, Gregory J. Gatto Jr., Lubert Stryer - Biochemistry-W. H. Freeman (2015), Ch.5
https://www.thermofisher.com/kr/ko/home/life-science/cloning/competent-cells-for-transformation/competent-cells-applications/comp-cells-for-protein-expression.html
https://www.sigmaaldrich.com/KR/ko/technical-documents/technical-article/protein-biology/protein-purification/optimizing-purification-of-histidine-tagged-proteins
https://www.rockland.com/resources/tips-for-optimizing-protein-expression-and-purification/