[충남대] 유전발생생물학실험 - Immunifluorescence
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소개글
충남대 유전발생생물학실험 보고서 입니다! (A+)목차
I. 서론II. 재료 및 방법
III. 결과
IV. 논의
V. 참고문헌
본문내용
면역형광법(Immunofluorescence)은 항원에 대한 항체의 특이성을 원리로 사용하여, 형광 염료를 세포 내의 특정한 생체 분자를 표적시켜 그 분포를 시각화하는 기술이다. 주로 형광단백질을 사용하여 항체의 위치를 보여주며, 형광현미경을 통해 그 결과를 확인할 수 있다.[1] 직접면역형광법은 형광 물질이 붙은 항체를 사용하여 표적 항원에 직접 결합하는 방식이다. 빠르고 특징적인 장점이 있지만 특정 표적 항언에 결합할 수 있는 항체의 수가 제한되어 있다. 간접면역형광법은 표지되지 않은 1차 항체, 1차 항체에 결합하는 형광 물질이 표지된 2차 항체를 이용하는 방식이다. 직접면역형광법보다 복잡하고 시간이 많이 소요된다.[2]세포가 스트레스를 받으면 그 결과로 RNA 과립(RNA granules)의 하나인 스트레스 과립(stress granules, SG)을 형성한다. 스트레스 과립은 세포질의 mRNA를 함유하는 입자이다. 스트레스 과립에 존재하는 대표적인 단백질로는 RasGAP SH3-부위 결합단백질 1 (G3BP1) 등이 있다.[3] G3BP1은 스트레스 과립 형성을 유도하며, 일반적으로 스트레스 과립의 marker로써 사용된다.[4] 스트레스 과립과 관련된 많은 단백질은 배양된 세포에 일시적으로 스트레스를 가하고, 형광 단백질에 융합된 단백질 또는 세포를 고정시킨 뒤 항체 등을 사용하여 형광현미경으로 검출할 수 있다.[5]
참고 자료
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김경민. 2012. RNA Granules and Stress Granules in Virus Systems, Journal of Bacteriology and Virology 2012. Vol.42, No.3 p.247–254.
Mahboubi et al. 2017. "Cytoplasmic stress granules: Dynamic modulators of cell signaling and disease, Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Basis of Disease. 1863 (4): 884–895.
Aulas A et al. 2017. Methods to Classify Cytoplasmic Foci as Mammalian Stress Granules, Journal of Visualized Experiments(123).
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Omer, A. et al. 2018. Stress granules counteract senescence by sequestration of PAI-1, EMBO reports, 19(5), e44722.
Yidong Ge et al. 2022. The roles of G3BP1 in human diseases, Gene, Volume 821.
Kapuscinski, J. 1995. DAPI: a DNA-specific fluorescent probe, Biotech, Histochem, 70 (5): 220–233.
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박정수. 2004. 세포노화, 세포자연사, 발암, Journal of The Korean Geriatrics Soci 2004:8(1):1-7.