소개글
Subculture A+레포트입니다.
목차
1. Title
2. Date
3. Name
4. Purpose
5. Materials
6. Methods
7. Results
8. Discussions
9. Project
10. Reference
본문내용
1. Title
Subculture(계대배양)
2. Date
3. Name
4. Purpose
세포는 분열을 위해 새로운 공간을 필요로 하지만, 배양접시(flask)의 한정된 공간에서는 세포증식이 제한될 수 있다. 계대배양(subculture)을 통해 세포증식에 필요한 적절한 공간을 제공해야 함을 이해한다.
5. Materials
Cells (cultured in T25 flask, 60㎜ dish), DPBS, Media (RPMI1640, FBS, P/S), 0.05% Trypsin-EDTA solution, cell scraper, alcohol lamp, micropipette, tip, rack, beaker, T25 flask, 60㎜ dish, 1.5㎖ ep-tube, 70% ethanol, tissue, incubator, centrifuge, clean bench
6. Methods
① 4℃에서 냉장보관 중이던 media를 37℃ water bath에서 충분히 pre-warmed.
② Clean bench에 넣기 전, pre-warmed media 및 필요한 실험기구들을 70% 에탄올로 소독한다. (Cell이 들어있는 flask, dish는 에탄올로 소독하지 않고 clean bench로 옮겨준다.)
③ 세포주를 배양 중인 배양접시 내부의 media를 micropipette으로 aspiration & discard.
* Tube에 소분된 DPBS, media는 사용 전후로 뚜껑 주변, 뚜껑 내부,tube 입구를 화염멸균하고 사용하며, ep-tube에 소분된 Trypsin-EDTA의 경우 화염멸균을 생략한다.
참고 자료
의생명과학 실험서, 이종호, 라이프사이언스, 2021, p. 31~35
세포 배양 입문 노트, 서한극, 바이오사이언스, 2018, p. 16, 20, 71, 72
Adherent Cell Culture vs. Suspension Cell Culture
https://www.thermofisher.com/kr/ko/home/references/gibco-cell-culture-basics/cell-lines/adherent-vs-suspension-culture.html
Guidelines to Maintain Cultured Cells
https://www.thermofisher.com/kr/ko/home/references/gibco-cell-culture-basics/cell-culture-protocols/maintaining-cultured-cells.html
Cell Dissociation and Trypsin for Cell Culture
https://www.thermofisher.com/kr/ko/home/life-science/cell-culture/mammalian-cell-culture/reagents/cell-dissociation.html
네이버 지식백과(동물학백과) - 트립신
https://terms.naver.com/entry.naver?docId=5842222&cid=63057&categoryId=63057
네이버 지식백과(두산백과) - EDTA
https://terms.naver.com/entry.naver?docId=1134434&cid=40942&categoryId=32277
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