정자 염색 및 운동성 관찰

소개글

생명과학실험 A+ 받은 자료입니다.
이번 자료는 실험에 오류가 발생하여 trouble shooting을 함께 첨부한 자료입니다.
염색 trouble shooting을 찾고 계신다면 추천드립니다.

목차

1. 재료
2. 방법
3. 결과
4. 논의
5. 참고문헌

본문내용

①Coomassie blue가 첨체에 염색이 되는 원리
Coomassie blue는 단백질을 염색하는 시약이다. Coomassie blue가 단백질을 염색하는 원리는 이 시약이 단백질에 있는 Arg, Lys, aromatic ring이 있는 아미노산 잔기들(Tyr, Trp, Phe), His 등과 결합하기 때문이다. Coomassie blue는 6개의 phenyl group 과 2개의 sulfonic acid group들을 통해서 단백질과 결합하는데, 소수성 결합과 반데르발스 결합을 한다. 정자의 머리에는 난자의 투명대와 결합하기 위해서 아크로신, 히알루로니다아제와 같은 효소와 여러 단백질을 가지고 있고 이것들을 감싸는 막 구조가 첨체이다. 첨체는 복잡한 단백질 중합체이기 때문에 첨체 부분이 염색이 되는 것이다. 효소를 어떻게 가지고 있는지는 논의 3번에서 설명한다.

②실험에서 고정과정이 필요한 이유
세포나 조직을 고정하는 이유는 가수분해 효소를 불활성화 시켜서 자가융해를 못하게 하기, 화학 물질의 용해 및 소실 방지, 미생물에 의한 부패 방지, 조직의 손상 방지, 염색이 잘 되게 하기 등의 목적이 있다. 고정을 하면 세포를 살아있을 때와 최대한 상태로 유지할 수 있고 염색을 할 경우 만약 고정이 되어있지 않으면 전사활성에 의해 세포 내로 들어온 염색약을 다시 밖으로 내보낼 수 있기 때문에 고정을 한다고 한다. Formaldehyde는 값이 싸고 살균력이 좋아 여러 분야에서 많이 사용하지만 formaldehyde가 산소와 빛을 만나면서 산화되어 포름산으로 바뀌게 되는데, 포름산과 헤모글로빈이 만나게 되면 산헤마틴이라는 갈색 인공 색소가 생성되게 된다. 이를 방지하기 위해 산화방지제를 첨가하기도 한다. 하지만 근원적으로 이를 막기 위해 NBF(paraformaldehyde 수용액)을 사용하게 되는 것이다.

③정자가 효소를 가지고 있을 수 있는 이유
정자는 sertoli cell에서 발달한다. 남성 생식 세포에서 유사분열을 거쳐 정원세포가 되고 또 유사분열을 1차 정모세포가 된다.

참고 자료

All about Biotechnology. Coomassie blue 염색 원리. 2022-05-29.
https://biotechnology.tistory.com/entry/%EC%BF%A0%EB%A7%88%EC%94%A8-Coomassie-Brilliant-Blue-%EC%97%BC%EC%83%89%EC%9D%80-%EC%96%B4%EB%96%A4-%EC%95%84%EB%AF%B8%EB%85%B8%EC%82%B0%EC%97%90-%EB%90%98%EB%8A%94%EA%B0%80
상지대학교 조직검사학 강의자료. Paraformaldehyde 사용 원리. 2022-05-29
https://www.sangji.ac.kr/kor/index.do
서영대학교 조직검사학 강의자료. 조직검사학 NBF. 2022-05-29
https://www.seoyeong.ac.kr/intro/main.do
David Hillis,「principles of Life」, 권혁빈, 라이프사이언스, 2014, p. 36, 46-47, 504-50
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이창주•이호준1 •윤용달. 『내분비계 장애물질이 생식계에 미치는 영향』. 대한내분비학회지 제 16권 제 6호 2001 . P. 596-623
국립축산과학원. 정자 적정 온도. 2022-05-30
https://www.nias.go.kr/front/main.do