actin filament 관찰 A+ report

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목차

1. Introduction
2. Materials & Methods
3. Result
4. Discussion
5. References

본문내용

-Objective
 FITC-conjugated phalloidin 사용하여 actin filament를 시각화하고, 세포의 모양과 구조를 관찰한다.
 형광 염색의 원리와 실험방법을 숙지하고, 형광현미경의 원리를 이해한다.

-Principle 및 Theory
가. 세포 내 actin filament의 기능과 배열 구조에 대해 서술하시오.
Actin filament(미세섬유)는 세포 내 가장 풍부한 단백질 중 하나로, 원형질막 아래에서 지지 기능을 하고 세포 모양을 결정하며 세포의 이동을 도와준다.
Actin filmament의 구조에 대해서 설명하자면, 세포 내에서 G-actin, F-actin 두 형태의 액틴으로 구성된다. G-actin은 구형 액틴(globular actin)으로 미세섬유의 기본단위이자 단량체이다. F-actin은 섬유성 액틴(filamentous actin)으로 actin protein이 중합하여 형성된 선형 filament로, 두 가닥의 G-actin 단위체가 꼬여서 이중 나선을 형성한다. 미세섬유는 양성과 음성말단이 있는데, (+)말단이 (-)말단보다 합성 및 분해속도가 빠르다. G-actin에 ATP가 붙어있을 때 결합력이 높은 상태가 된다. G-actin의 농도가 높으면 미세섬유 말단에 붙어있는 G-actin의 ATP가 가수분해되기 전에 다른 G-actin이 와서 붙으므로 ATP가 분해되지 못하고, 동적 평형이 될 때까지 미세섬유가 신장된다. 그러므로 G-actin의 농도가 높을수록, ATP가 많을수록 미세섬유는 신장된다.
Actin filament의 기능은 여러 가지가 있다.
① 미세섬유와 여러 단백질들이 교차결합을 형성해서 탄력 있는 세포막 근처의 구조를 만든다.
② 소장 상피세포의 미세융모를 지지: 표면적을 넓혀 물질이 잘 흡수되도록 세포막을 융기시켜 미세융모를 형성한다.
③ 근육운동: 미세섬유의 운동단백질인 ‘미오신’은 ATP를 쓰면서 미세섬유를 활주시켜 근수축이 일어나게 한다. 미오신의 머리에는 ATPase활성이 있어 ATP를 가수분해시키며 근육운동이 일어날 수 있다.

참고 자료

https://www.ksmcb.or.kr/file/webzine/2010_07_02.pdf (Actin filament)
https://terms.naver.com/entry.naver?docId=1158317&cid=40942&categoryId=32276 (formaldehyde)
https://ko.wikipedia.org/wiki/%ED%8A%B8%EB%9D%BC%EC%9D%B4%ED%86%A4_X-100 (Triton X-100)
https://blog.naver.com/mpbio/223384041612 (BSA)
https://en.wikipedia.org/wiki/DAPI (DAPI)
https://terms.naver.com/entry.naver?docId=5782003&cid=62861&categoryId=62861
https://en.wikipedia.org/wiki/Lamellipodium
https://terms.naver.com/entry.naver?docId=5568825&cid=61233&categoryId=61233