세포생물학실험 만점(A+) 실험 보고서(레포트) 08. Hematoxylin and Eosin(H&E) 염색법

소개글

세포생물학실험 만점(A+) 실험 보고서(레포트) 08. Hematoxylin and Eosin(H&E) 염색법 관련 레포트 입니다.

목차

１.   서론
 
２.   실험 목적
 
３.   실험 방법
가.    실험 재료(도구)
1)      샘플
2)      시약
3)      장비
나.    실험 방법
 
４.   실험 결과
 
５.   논의 (고찰)
 
６.   참고문헌

본문내용

파라핀 블록을 통해 제작한 조직 절편을 Hematoxylin과 Eosin(H&E) 염색을 진행하고, 이를 통해 조직 내의 세포핵과 세포질을 관찰할 수 있다. 파라핀 블록을 통한 조직 절편 H&E 염색은 ‘탈파라핀  수화  수세  헤마톡실린염색 청색화  에오신 염색  탈수  투명화  봉입’의 과정으로 수행된다.
‘탈파라핀’ 과정은 슬라이드에 접착되어 있는 조직 내에 침투되어 있는 파라핀을 H&E 염색을 진행하기 위해 제거하는 과정이다. 조직 내에 존재하는 파라핀은 조직과 염색 시약과의 반응을 차단하기에 꼭 필요한 과정으로, 에탄올, 파라핀과 모두 잘 용해되는 성질을 지닌 Xylene을 이용해 서서히 조직으로부터 파라핀을 제거한다.
‘수화’ 과정은 조직으로부터 염색 과정에서 염색 반응을 방해하는 Xylene을 제거하는 과정이다. 탈파라핀 과정에서 파라핀 제거하기 위해 이용했던 Xylene을 제거하기 위해서 에탄올을 이용하는데, 파라핀 블록을 제작할 때와는 반대로 에탄올 농도를 고농도에서 저농도 순으로 에탄올의 농도를 낮춰가면서 수화 과정을 수행한다. Xylene은 물과 만나면 기름 방울이 출현하는 특징을 지니고 있기 때문에, 천천히 에탄올을 고농도  저농도 순으로 사용하여 수화 과정을 진행해야 한다.
‘수세’ 과정은 수화 과정에서 사용된 알콜 성분인, 에탄올을 제거하는 과정으로 DW를 이용하여 진행한다.
‘헤마톡실린 염색’ 은 음전하를 띠고 있는 세포핵을, 양전하를 띠고 있는 염기성 염료인 헤마톡실린을 이용하여 염색하는 과정이다. 세포핵은 핵 속에 존재하는 핵산의 인산기가 음전하를 띠고 있기 때문에, 세포핵을 염색하기 위해서는 음전하와 선택적으로 결합하여 청색으로 나타나는 헤마톡실린 시약을 사용한다.
‘청색화’ 과정은 헤마톡실린으로 조직을 염색한 이후, 염색한 조직이 완전한 청색보다는 자색에 가까운 색으로 염색되기 때문에, 이를 완전한 청색으로 바꿔주기 위해 진행한다. 이번 실험에서는 Ammonia water을 이용하여 청색화 과정을 진행하였다.

참고 자료

조경빈. "위염 진단을 위한 조직 염색법의 비교 분석." 국내석사학위논문 고려대학교 대학원, 2022. 서울
김기정. "다양한 포르말린 고정액에 따른 병리 조직의 특수염색 및 면역조직화학염색 양상 비교." 국내석사학위논문 을지대학교 대학원, 2023. 대전
김승업, “세포배양: 하나부터 열까지 알아보기”, 국내서 단행본, 서울: 자유 아카데미, 2008 (p.195~198)