[만점자료] DNA전기영동과 SDS-PAGE 실험 보고서

소개글

"[만점자료] DNA전기영동과 SDS-PAGE 실험 보고서"에 대한 내용입니다.

목차

1. DNA 전기영동 (DNA gel electrophoresis)
(1) 개요 (Introduction)
(2) 준비물 (Materials required)
(3) 실험방법 (Method)
(4) 실험결과 (Result)
(5) 고찰 (Discussion)

2. SDS-PAGE
(Sodium dodecyl sulfate – polyacrylamide gel electrophoresis)
(1) 개요 (Introduction)
(2) 준비물 (Materials required)
(3) 실험방법 (Method)
(4) 실험결과 (Result)
(5) 고찰 (Discussion)

본문내용

(1) 개요 (Introduction) DNA 전기영동은 PCR(Polymerase chain reaction)을 통해 유전자를 증폭시킨 후, 전기를 이용해 DNA를 크기별로 분리하는 데에 그 목적이 있다. 목적 샘플을 PCR로 DNA를 증폭한 후, Marker와의 비교를 통해 목적 유전자의 크기를 알아낼 수 있다. 먼저 PCR은 핵산 중합효소를 이용하여 DNA 혹은 RNA를 증폭시킬 수 있는 기술이다. PCR은 고온에서 이루어지며, 고온 저항성이 있는 Taq polymerase를 이용하는 것 이 일반적이다. 이 기법의 경우 DNA 변성(Denaturation), Primer 부착(Annealing), 마지막으로 신장(Extension) 과정을 거치며 완료된다. 이 실험은 반복을 거듭할수록 유전자가 지수적으로 증폭되므로 목적하는 양만큼 수득할 수 있는 장점을 지닌다.
다음으로 아가로오스 겔 전기영동(Agarose gel elctrophoresis)은 말 그대로 한천 (Agar)을 이용해 만든 겔을 이용하여, DNA를 크기별로 분류하는 데 쓰이는 방식이다. PCR과 함께 쓰이는 경우, 목적하는 유전자가 제대로 증폭되었는지 Marker와의 비교를 통해 알아낼 수 있다.
(2) 준비물 (Materials required)
- Erlenmeyer flask, Micropipette and tips, Falcon tube, Microtube
- Microwave, PCR machine, Electrophoresis machine, UV detector
- PCR mixture (=dNTP, DNA polymerase, buffer, water), Agarose powder
- Template DNA, DNA primer, DNA ladder
- TAE buffer, EtBr
(3) 실험방법 (Method)

참고 자료

Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K., & Walter, P.
(2014). Molecular Biology of the Cell (6th ed.). Garland Science.
Berg, J. M., Tymoczko, J. L., Gatto, G. J., & Stryer, L. (2015).
Biochemistry (8th ed.). W.H. Freeman.