[유전생화학] folin 법을 이용한 단백질 정량 분석

목차

1. 서론
2. 실험방법
3. 결과
4. 실험결과
5. 고찰
6. 관련자료

본문내용

- 단백질의 변성이 없다.
- 더 정확한 방법을 사용하기 전 간단하게 단백질의 존재유무를 측정할 수 있다.
- column fraction에서 단백질을 확인하는데 적당한 방법이다.
단점
- buffer나 salt, 그외 다른 biological materias(특히 핵산)의 오염에 대단히 영향을 많이 받는다.
- 주로 방향족 아미노산의 흡수도에 의존하므로, 샘플 단백질의 조성에 따라 차이가 많이 나므로 부정확하다.
.-pH나 ionic strength에 의해서도 영향을 많이 받는다.
주의사향
- A280/260 비는 단백질이나 핵산의 순도를 판단하는 기준으로 사용된다.
- glass cuvette은 UV를 흡수하므로 반드시 quartz 를 사용한다.
- 단백질 정량식
[Protein] (mg/mL) = 1.55*A280 - 0.76*A260
-정확한 정량을 위해서는 알고있는 농도의 단백질로 standard curve를 잡는 것이 좋다
- blank buffer는 단백질을 녹인 용액과 동일하게 한다.
- 만약 샘플의 A280이 2 이하이면 샘플을 더 희석하지 않아도 되지만 2이상이면 더 희석해야 한다.

참고 자료

Protein method(2nd edition) by D.Boollag (WILEY-LISS)
The tools of biochemistry by T.G. Cooper(WILEY-LISS)