DNA 농도 측정

목차

Ⅰ. 제목
Ⅱ. 실험목적
Ⅲ. 실험도구 & 재료
Ⅳ. 실험방법
Ⅴ. 실험이론
Ⅵ. 실험결과 & 토의
참고문헌

본문내용

Ⅰ. 제목 : DNA 농도 및 순도 측정

Ⅱ. 실험목적
Spectrophotometer를 이용하여 DNA 농도 및 순도를 측정한다.

Ⅲ. 실험도구 & 재료
Spectrophotometer(분광광도계), 큐벳(cuvette),시료(증류수 995㎕+DNA 5㎕),파이펫

Ⅳ. 실험방법
①Spectrophotometer(분광광도계)의 파장을 260nm과 280nm로 맞춘다.
②시료를 준비한다(증류수 995㎕+DNA5㎕)←1/200 희석
③깨끗이 닦은 cuvette(DNA用:석영)에 증류수를 넣고 영점 조정을 한다.
④준비한 시료를 넣고, O.D(optical density)를 측정한다.
-DNA농도(260nm)
-DNA농도(260/280nm)
※주의사항
cuvette은 깨뜨리지 않도록 조심히 다루고, 빛이 통과하는 부분(투명한 부분)은 지문이 묻지 않도록 잘 닦는다.
* DNA 농도 측정 방법
<260nm에서 O.D값이 1 일 때 DNA 농도는 50ng/㎕>
농도(ng/㎕)=O.D값 * 50 * 희석배수
순도 범위:RATIO(260/280nm)1.8~2.0일 때
<1.8: protein contamination
>2.0: RNA contamination
* 전기영동에 의한 Total RNA의 순도검정
Total RNA 1~2 ㎍를 열변성(10분)하여 1% agarose gel(TBE buffer)에 전기 영동한다.

참고 자료

없음