[동물발생학] 쥐의 성기관 RNA 분리

목차

1) AGPC법 (Acid Guanidium thiocyanate-Phenol-Chloroform extract)
1. 세포와 조직의 준비
2. RNA 분리
2) Poly RNA의 정제
3) RNA의 확인 및 정량

본문내용

AGPC법 (Acid Guanidium thiocyanate-Phenol-Chloroform extract)은 RNA를 추출을 1단계로 간소화함으로써 빠르고 간편하게 분리할 수 있을 뿐 아니라 RNase로부터의 오염을 최소화하였다. 세포나 조직을 guanidium thiocyanate와 함께 마쇄한 다음 낮은 pH 하에서 Phenol ; Chloroform으로 추출하고 원심 분리하게 되는데 이 단계는 곧 RNA의 순도나 양에 손상을 주지 않고 빠르게 추출할 수 있도록 한다. 그러나 APGC법은 RNA 추출 후 다당체와 단백당질이 가끔씩 오염되는 경우가 있어 RNA 용해를 방해하거나 RT-PCR 반응을 억제하고, RNA blotting을 할 때 membrane에 결합하는 문제를 야기할 수 있다. 또한 triglycerid가 풍부한 지방성 조직으로부터 RNA의 추출은 효율이 좋지 않다.

참고 자료

없음