[생명공학] Realtime PCR

소개글

Realtime PCR의 외국자료를 편집 및 수정한 내용입니다. 많은 도움이 되시길 바랍니다.

목차

- 전통적인 PCR 의 한계
- Real – Time PCR 의 소개
- Real – Time PCR의 장점

본문내용

☆ End-Point PCR의 한계 ☆
End-point PCR은 시간 소모가 많으며 결과를 보는데 하루 이상의 시간이 걸릴 수도 있다. 결과는 크기 구별로 하며, 이 방법은 정확하지 않은 방법이다. 시료 사이의 차이에 있어서, gel은 그 차이를 구분하지 못하는 반면에 real-time PCR은 이러한 차이에 민감하다. Agarose Gel의 분석은 미약하며 약 10 fold 차이를 구분한다. Real-time PCR은 2-fold 이하까지 감지할 수 있다.

Ø 정밀도 떨어짐
Ø 감도 떨어짐
Ø Short dynamic range < 2logs
Ø Low resolution
Ø Non-Automated
Ø 크기에 관련된 차이만 감지
Ø 결과가 숫자로 표현되지 않는다.
Ø EtBr은 정량적으로 쓰일 수 없다.
Ø PCR 실행 후 해야 한다.

☆ PCR Phases ☆
1. Exponantial : cycle 마다 생산성이 두배 ( 100% 반응 효율 )이며, 반응은 매우 특이적이며, 정밀하다.
2. Linear : 결과물이 차츰 소모되며, 반응이 느리다.
3. Plateau (End-Point : Gel Detection for traditional methods) : 반응이

참고 자료

없음