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High performance liquid chromatography (HPLC) - chiral separation

*대*
최초 등록일
2005.05.12
최종 저작일
2005.05
11페이지/ 한컴오피스
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소개글

cyclodextrin column을 이용한 chiral separation실험에 대한 분석화학실험 결과레포트 입니다.

목차

Introduction

Experimental
-Materials
-Column Evaluation

Result and Discussion
-Reaction
-HPLC
-Capacity factor,k'
-Resolution
-Van deemter equation
-Spiking
-Fronting and tailing
-HPLC detector
-Methode of chiral separation

References

본문내용

γ-cyclodextrin column을 이용해 FMOC-D,L-serine으로 HPLC를 했다. FMOC-D,L-serine과 FMOC-L-serine을 1 : 1 로 섞어서 만든 용액으로 HPLC를 해서, D,L-serine의 enantiomeric excess를 구했다. 또, 여러 가지 컬럼에 관련된 값들을 구했다.
Racemate인 D,L-serine을 Chiral separation하기 위해 Chiral stationary phase로 γ-cyclodextrin column을 사용하여 HPLC를 했다. 왜 필수 아미노산도 아닌 serine을 chiral separation하는 것을 이번 실험에서 했을까? 그 이유는 serine이 생명으로서의 활동에 필수적은 neuron을 연구하기 위해 쓰이기 때문이다.1) serine은 필수 아미노산은 아니지만, neuron의 발생, 생존, 발달에 필수적이다.
L-serine은 spiking의 용도로 쓰였다. D,L-serine 만으로 HPLC를 한 후, L-serine과 D,L-serine을 1 : 1로 섞어서 증가한 신호로부터 어느 peak이 D-serine이고, L-serine인지
확인 할 수 있다.
HPLC를 하는 것은 좋지만, 분리되는지 안 되는지, 됐다면 얼마나 많은 양이 존재하는 지를 검출 할 수 있어야 한다. 따라서 Serine을 HPLC의 detector인 UV detecter에 검출시키기 위해 FMOC-Cl과 반응시킨 후, HPLC를 행하여야 한다.

참고 자료

1) http://www.brain.riken.jp/bsi-news/bsinews16/no16/speciale.html
2) X. Han, Q. Zhong, D. Yue, N. Della Ca , R. C. Larock, D. W. Armstrong., Chromato -graphia. 61, 205 (2005)
3) Armstrong, D.W., Li, W., Chang, C., Pitha, J., Anal. Chem. 62, 914 (1990)
4) Buser, R., Muller, M.D., Anal. Chem. 67, 2691 (1995)
5) Carpino, L. A. J. Amer. Chem. Soc. 115, 4397 (1993)
6) Carpino, L. A. et al. J. Chem. Soc. Commun. 201, (1994)
7) 분석화학 4th ed, chapter 11, 표 11-1
8) http://www.gfschemicals.com/chemicals/gfschem-2037.asp
9) http://www.sefsc.noaa.gov/HTMLdocs/BorateBuffer10.htm
10) http://www.ilabguide.com/data/lc/lecture/col_select.pdf
11) J. M. Papanikolas, J. R. Gord, N. E. Levinger, D. Ray, V. Vorsa, and W. C. Lineberger, J. Phys. Chem. 95, 8028 (1991)

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