[생명공학] 자외선 흡광도에 의한 DNA 농도 측정 및 Lambda DNA의 온도에 따른 흡광도의 변화관찰

목차

1.제목
2.목적
3.원리
3 .원리
1) 흡광도와 DNA melting의 원리
-자외선 분광 광도계란?
- 흡광도란 ? (OD- Optical Density)
- DNA 흡광 실험의 원리
2) DNA란?
- 구조
- Lambada DNA
- DNA melting Temperature

본문내용

자외선 분광광도계를 이용하여 시료의 흡광도를 측정하고, 이를 이용하여 DNA의 농도를 산출하고, 그 원리를 이해한다. 또한, 온도에 따른 DNA의 상태변화를 확인하기 위하여 항온수조를 이용하여 시료의 온도를 높이면서 흡광도를 측정한다. 측정한 흡광도를 토대로 melting curve를 작성하여 DNA의 melting temperature(Tm)값을 구하여 본다.
DNA 구성의 기본 단위는 뉴클레오티드이다. 기본적으로 뉴클레오티드는 염기+당+인산으로 이루어져 있다. 여기서 당과 인산은 그 특유의 나선성 본질로 인해 DNA 이중 나선구조를 이루는 주 뼈대가 되고, 염기는 서로 상보적인 결합을 하여 그 서열 순서에 따라 유전자의 유전정보를 달라지게 하는 역할을 한다.
일반적으로 DNA 구조의 구성 원리는 염기쌍들간의 수소결합이 먼저가 아니라 뼈대가 먼저인 상태에서 나선 두개가 꼬여서 올라가면, 가운데 축쪽으로 염기가 위치를 하게 되는데 공교롭게도 그 빈공간의 크기는 퓨린-피리미딘이 수소결합을 하면 딱 맞는 크기가 되는 것이다. A(퓨린)-T(피리미딘), G(퓨린)-C(피리미딘)가 위치했을때 그 나선형 본질에 적합하게 되는 것이고 가장 안정적이 될 수 있는 것이다.
DNA 구조의 특징은 다음과 같다.
1.두개의 나선형 폴리뉴클레오티드 사슬들이 공통의 축 둘레에 감겨있다. 사슬은 서로 반대방향으로 나아간다.
2.퓨린과 피리미딘 염기들은 나선 안쪽에 있지만, 인산과 데옥시리보오스 단위들은 바깥쪽에 있다. 염기들의 면은 나선축에 수직이며, 당들의 면은 염기들의 면에 거의 수직이다.
3.나선의 직경은 20A, 인접염기는 나선축을 따라 3.4A만큼 떨어져있고, 36도만큼 회전한다. 10개의 서열이 지나가면 나선이 한바퀴를 돌게되고 그 축을따라 거리가 34A이 된다.
4.두 사슬은 쌍을 이룬 염기들 사이의 수소결합들로 결합된다. A-T, G-C
5.폴리뉴클레오티드 사슬에서 염기들의 결합순서는 전혀 제약이 없으며 염기들의 순서가 유전정보를 지닌다.

참고 자료

광림사 「생명과학」 thomson
네이버 지식검색 : http://opendic.naver.com/100/entry.php?entry_id=97832
http://kin.naver.com/browse/db_detail.php?dir_id=110204&docid=375081