[미생물학] 미생물염색법

목차

1. Introduction
▶ 염색
▶ 세균 염색법과 색소
▶ 단염색(Simple staining)
▶ 생체염색(Vital staining)
▶ 감별염색법(differential staining)
- 그람염색법(Gram's staining)
- 항산성 염색(Ziehl, 1884)
▶ 특수염색법
- 아포염색
- 편모염색
- 협막염색
- 이염소체염색
- 핵염색
2. Material & Methods
- 그람 염색법(gram staining)
3. References

본문내용

현미경으로 세균을 관찰할 때
(1) 살아있는 상태 그대로를 검경하는 경우,
(2) 고정상태에서 색소로 염색하여 검경하는 경우가 있다. 전자는 세균의 운동상태, 형태, 크기 등이 관찰되며, 후자는 염색체에 대한 친화성의 차이에 의한 형태 관찰과 함께 세균분류에 사용된다.

염색의 의의는 다음과 같다.
(1) 세균의 분류와 동정에 필수불가결한 방법이다.
(2) 검체의 세균유무와 균량을 간단히 알 수 있다.
(3) 대충 어림으로 세균형태를 보아 균종이 추정되며, 세균 감염증 진단에 도움이 되며, 또 한 조기에 항생물질의 선택방침을 결정할 수 있다.

▶ 세균 염색법과 색소
세균 염색에 사용하는 염색제의 대부분은 aniline색소이고 염기성 색소와 산성 색소가 있다. 염산염, 나트륨염, 칼륨염 등의 염 형태로 시판되고 있다.
염기성 색소는 해리되어 양(+)이온으로 하전되는 색소분자를 유리하며, 산성 색소는 그 반대로 음(-)이온으로 하전되는 색소분자를 유리한다.

methylene blue++Cl-: 염기성 색소
eosin-+Na+: 산성 색소

세균의 균체에는 핵산이 다량 함유되어 있고 그 인산기는 음성 하전이므로 양성하전의 염기성 색소와 잘 결합하여 염색된다. 한편 조직세포의 세포질은 양성하전이므로 산성 색소로 염색된다.
염기성 색소는 methylene blue, basic fuchsin, crystal violet, safranin O, bismark brown 등이 있고 염색성을 높이기 위하여 염색촉진제로서 석탄산, 수산화칼륨, 초산 등이 첨가된다. 그리고 매염제로서는 탄닌산, 피크린산, 명반, 황산제 1철 및 요드 등이 사용된다. 세포성분과 색소와의 결합력에는 강약이 있어서 목적 이외의 것에도 염색되는 일이 있으므로 일단 염색한 것을 선택적으로 탈색하는 방법이 채택되었다. 탈색제로는 alcohol, acetone, 1-3% sulfuric acid, 3% HCl alcohol 등이 쓰인다.
염기성 색소에 잘 염색되는 세포를 호염기성, 산성 색소에 잘 염색되는 세포를 호산성이라 부른다.

▶ 단염색(Simple staining)
단순히 세균의 형태만을 관찰할 때 많이 사용한다. 염색액으로 보통 메틸렌 블루, 크리스탈 바이올렛, 염기성 푸크신 등이 많이 쓰인다.

참고 자료

- 박석기외, 최신미생물학, 신광문화사, 1995,
- 미생물학 실험교재 편찬위원회, 미생물학 실험, 월드사이언스, 1995,