[생화학] Indirect ELISA

목차

1.Subject
Indirect ELISA (효소항체법 : Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay)

2.Introduction
ELISA
1)direct ELISA
2)sandwich ELISA
3)indirect ELIS

3.Materials & Methods
1)Materials
2)Methods

4.Result
5.Discussion
6.reference

본문내용

*ELISA
:면역학적 반응들은 매우 높은 수준의 민감도(sensitivity)와 특이도(specificity)로 인하여 분석 또는 검출 과정에 이용되어 왔다. 방사성 동위원소를 사용하지 않는 결합 검색법으로는 항체를 이용한 ELISA가 널리 사용된다. ELISA 법은 생물학적 물질의 분석에 특히 유용한 여러 가지 Marker(enzyme)를 접합시킨 항체 또는 항원이 사용 되어진다
1)direct ELISA
2)sandwich ELISA
3)indirect ELIS
이 경우에는 보통 표준 리간드를 고정시키고 용액상의 수용체나 단백질을 증가하여 결합을 유도한다. 결합된 수용체의 양은 수용체에 특이적으로 작용하는 항체를 가하여 결정하는데, 이때 가해진 1차 항체의 양은 색깔을 유도할 수 있는 2차 항체를 가하여결정한다.
이들 2차 항체는 항체의 꼬리 부분을 인지하는 항체인데, 2차 항체의 꼬리에는 알칼린 포스파타제나 peroxidase 등의 효소가 연결되어 있고, 이들 효소의 작용으로 용액 속에 색깔을 유도하는 것이다.
싸고 빠름. (항원을 토끼에 주입, 4주 후 1차 항체 습득)
*The Solid Phase
원 및 항체는 solid phase에 흡착되는데 이것은 test중에 면역 반응이 일어난 것과 그렇지 않은 것을 구분하는 첫 번째 단계이며, 그 흡착되는 양을 충분히 하여 반응물질의 양을 소화할 수 있도록 할 필요가 있다.
특별히 고안된 polystyrene으로 만들어진 microplates가 널리 사용되며, 대부분의 항원과 항체의 흡착에 있어서 재현성 및 높은 효율을 제공한다.

참고 자료

http://www.asanbiotech.co.kr/content.php?co_id=inform03b&mode=inform
http://ccm.ucdavis.edu/cpl/Tech%20updates/TechUpdates.htm