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[생명공학]자외선 흡광도에 의한 DNA 농도 측정 및 Lambda DNA의 온도에 따른 흡광도의 변화관찰 - 예비 레포트

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최초 등록일
2005.09.27
최종 저작일
2004.03
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목차

제목
목적
이론
원리
방법
참고문헌

본문내용

(2) 실험 목적 : 자외선 분광광도계를 이용하여 시료의 흡광도를 측정하고, 이를 이용하여 DNA의 농도를 산출하고, 그 원리를 이해한다. 또한, 온도에 따른 DNA의 상태변화를 확인하기 위하여 항온수조를 이용하여 시료의 온도를 높이면서 흡광도를 측정한다. 측정한 흡광도를 토대로 melting curve를 작성하여 DNA의 melting temperature(Tm)값을 구하여 본다.

(3) 실험 원리
*흡광도에 관련한 것들*
① 흡광도: 흡광도란 매질에서 빛을 흡수하는 정도를 말한다.
흡광도는 Beer의 법칙에 의해 정의 되는데,
흡광도(A)= aBC
; a는 몰 흡수계수, B는 시료를 담고 있는 용기의 길이(빛이 시료를 통과한 전체 길이), C 는 시료의 농도 이다.(a는 상수이기 때문에 시료의 농도를 변화시켜 가면서 반복측정을 하면 C와 a의 관계에 대한 1차함수 그래프를 얻을 수 있는데, 이것의 기울기가 a값이 되게 된다.)
흡광도가 0이라는 것은 모든 빛을 그냥 통과 시킨다는 것이다. 즉, 시료셀(시료를 담는)은 어떤 파장의 빛에도 흡광도가 0에 가까워야 한다. 셀자체가 빛을 흡수한다면, 디텍터의 감도도 떨어지며, 정확한 실험이 불가능하기 때문이다. 그래서 보통 흡광도 측정 시에는 석영제품이 많이 쓰인다.
② 투과도: 어떤 빛이던 어느 물체를 통과해 나갈때 100%로 투과라는 것은 있을 수가 없다.투과도라는 것은 빛이 물체를

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없음
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