소개글
미생물배지와 생균수 측정 레포트 입니다
목차
제목
목적
준비물 :
실험방법
결과
토의
이론
출처
본문내용
제목 : 미생물배지와 생균수 측정
목적 : 미생물을 증식시킬 수 있는 배지를 만들 수 있고, 배양된 생균수를 셀 수 있다.
준비물 : NA [Nutrient Broth(NB), Bacto Agar], autoclave clean bench, 메스실린더, 삼각플라스크3개, 호일, 장갑, 저온배양기, 멸균 생리식염수, 전자저울, 오토피펫, 스푼2개, 여자화장실 변기물, 증류수, 페트리디쉬 3개,
실험방법
* 혼합 평판 배양법 또는 주입평판 배양법(Pour plate method)
1) Nutrient Broth(NB)를 0.16g을 전자저울에 재어 3개씩을 준비했다.
※ 8g/L로 만들 것.
→ 한 페트리디쉬 당 20ml을 넣을 것이므로 0.16g을 취하였다.
8g : 1000ml = x : 20ml x = 0.16g
균을 원액, 10배 희석, 100배 희석을 배양할 것이므로 0.16g 3개를 준비했다.
2) Bacto Agar 0.4g를 전자저울에 재어 3개씩 준비했다.
※ 100ml에 2% 즉, 2g이 있는 것을 만들 것.
→ 한 페트리디쉬 당 20ml을 넣을 것이므로 0.4g을 취하였다.
2g : 100ml = x : 20ml x = 0.4g
균을 원액, 10배 희석, 100배 희석을 배양할 것이므로 0.4g 3개를 준비했다.
3) 준비한 NB와 Bacto Agar를 삼각플라스크 3개에 각각 넣고 증류수 20ml을 넣었 다.
4) 적당히 섞어 어느 정도 녹인 후, 호일로 입구를 막고 Agar가 굳기 전에 autoclave에 넣었다.
5) 고압 멸균한 후, 45~50℃로 유지시켜 두었다.
6) 여자화장실 변기의 물을 준비하였다.
․여자화장실 변기물에서 시료를 1ml를 취했다.
․시료 1ml 중에 100㎕를 취했다.
․여기에 900㎕ 생리식염수에 넣고 1/10의 희석액을 만들었다.
․1/10 희석한 균액 1ml중에 100㎕를 취하여 900㎕ 생리식염수에 넣고 1/100 의 희석액을 만들었다.
7) 준비된 균액에서 각각 1ml씩을 뽑아내어 만들어 둔 배지에 떨어뜨려 혼합한 후 멸균 페트리 접시에 부었다.
8) 배지가 굳은 후에, 접시를 뒤집은 상태로 항온기에 넣고 37℃에서 48-72시간 배양했다.
참고 자료
네이버 지식IN
최신 실험 미생물학(신일상사)
전홍기, 공재열 ‘미생물공학’ 동지기술, 1993.
박완희, 전수진 ‘최신미생물학’ 정문각, 1995.
전홍기, 이재동 ‘생활미생물학’ 녹문당, 1999.
http://100.search.chol.com/cgi-bin/search.cgi?kid
http://hankukm.com.ne.kr
http://www.khp.ac.kr/study/미생물학 실습4.hwp
http://member.tripod.lycos.co.kr/gaggad/plate1.htm