[유전학]TLC에 의한 엽록소의 분리 및 흡광 스펙트럼 분석
- 최초 등록일
- 2005.11.04
- 최종 저작일
- 1997.01
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소개글
유리판 위에 흡착제의 얇은 층(250μm 전후)을 만들어 이것을 고정상으로 하고, 유기용매를 전개유동상으로 한 크로마토그래피로, 종이크로마토그래피와 같은 목적으로 사용한다. 1951년 J.키르치너의 크로마토스트립법에 발단하여, 1956년 독일의 E.슈탈에 의해 일반화되었다. 흡착제로는 사용목적에 따라 실리카겔, 산화알루미늄, 섬유소말, 이온교환세를로오스 등이 쓰인다.
이 방법은 종이크로마토그래피에 비해 전개시간이 짧고(30~60분), 분리능률이 양호하며, 강한산, 강한 염기나 강렬한 시약 등을 발색시약으로 사용할 수 있는 특징을 지니고 있다. 유기화합물의 분리, 정제, 정량, 순도 검정, 반응이나 대사과정의 추적, 무기이온분석 등 응용범위가 넓다. TLC는 매우 손쉽고 빠르게 할 수 있어서 혼합물 조성의 1차적인 분석방법으로 사용되고 관 크로마토그래피(Column Chromatography)를 위한 최적의 elution solvent를 찾는데도 유용하게 사용되며 특히 아주 적은 양으로도 시료를 분석할 수 있는 점이 장점이다.
목차
없음
본문내용
TLC의 목적?
크로마토그래피는 물질을 분리하는 방법입니다. 그러나 특히 TLC의 경우는 물질의 분리 자체가 목적이 아니라 분리를 통하여 미지 물질을 기존의 물질과 비교하여 동정 (identification)하는 목적으로 많이 사용합니다. 구체적으로 용도별로 몇 가지로 나눌 수도 있습니다.
1) 반응이 진행되는 것을 알아보기 위함. 반응물의 TLC 결과 Rf 값을 알고, ㅂ반응이 진행되는 과정의 생성물을 TLC하면 반응물이 줄고 생성물이 느는 것을 알 수 있다.
2) 미리 예측되는 생성물의 Rf값과 비교하여 실험에서 얻은 물질이 우리가 아는 물질인지 아닌 지를 판별할 수 있다.
3) 경우에 따라 Preparatory TLC를 통해 특정 물질의 정량도 가능하다.
4) 같은 방법으로 여러 혼합물에서 특정 화합물의 분리가 가능하다.
TCL은 고정상과 이동상으로 나누어 지는데, 고정상에는 silica gel을 사용하였고 이동상에는 헥산과 에테르, 그리고 아세톤이 6:3:2의 비율로 사용되었다.
시료는 10㎕로, 시금치 잎 20㎎에 해당된다. 여기서 고정상인 실리카 겔은 용매가 극성이며, 이동상은 비극성이다.
참고 자료
없음