[바이러스 세포]세포배양과 바이러스 접종실험

소개글

바이러스학 실험 세포배양과 바이러스를 접종한 후 계대배양한 실험입니다.
PK15 cell로 했습니다. 사진도 첨가했고, Titration 을 위해 CPE 여부를 표로 계산했습니다.

목차

실험1.세포배양-바이러스접종-Titration
1>개요
2>실험 준비
3>실험과정 및 고찰

실험2. 바이러스 접종

실험3.Titration

본문내용

✪실험 결과및 고찰
*Virus Titration 계산은 일반적으로 Reed-Muench method를 쓴다. 이 과정에서 TCID을 사용하는데, 50% Tissue culture infection Dose의 약자이며, 전체 Cell culture중에서 50%의 집단을 감염시킬 수 있는 바이러스의 희석배수를 뜻한다. 이것은 바이러스의 역가를 나타내는 하나의 지표로 사용된다.
Reed-Muench Method에서 Proportinate distance(D)를 우선 구해야 하는데, 이것은 50%이상 사망률을 나타내는 집단의 %에서 50%이하의 사망률을 나타내는 집단의 %를 뺀 값에 대한 50%이상의 사망률을 나타내는 집단의 %에서 50%를 뺀것의 값이다.Log LD은 -Log(dilution above 50% mortility)+D이다. 따라서 TCID은 가령 Log LD의 값이 7이 나왔다면 10/50ul이 되므로, 10×2/ml가 된다. 따라서, 바이러스의 역가는 10TCID/ml이 되게 된다. 이것은 물론 하나의 예를 든 것이다. 이외에도 Karber Method도 있는데,보편적으로 Reed-Muench method를 많이 쓰는 편이다.

우리는 96 well plate를 관찰한 결과 0번에서 5번까지는 모두 CPE를 관찰할 수 있었고, 6번 라인 well은 A, B, E, G, H에서만 CPE를 관찰 할 수 있었다. 그 외 나머지 10번과 Control라인은 모두 CPE를 관찰할 수 없었다. 이 관찰 결과를 토대로 CPE(+)(-)와 누적(+)(-)와 %를 계산할 수 있었다.

참고 자료

없음