[미생물]미생물배지와 생균수 측정

소개글

미생물배지와 생균수 측정

목차

제목
목적
준비물
실험방법
결과
이론
토의
출처

본문내용

제목 : 미생물배지와 생균수 측정

목적 : 미생물을 증식시킬 수 있는 배지를 만들 수 있고, 배양된 생균수를 셀 수 있다.

준비물 : 페트리디쉬 3개, 메스실린더, 삼각플라스크3개, 호일, 장갑, autoclave clean -bench, 저온배양기, 멸균 생리식염수, 전자저울, 오토피펫, 스푼2개 nutrient broth, bacto agar, 우유, 증류수,

실험방법

혼합 평판 배양법 또는 주입평판 배양법(Pour plate method)
①Nutrient broth(NB)를 0.16g을 전자저울로 덜어냈다.
8g/L로 만드는 것이 좋은데 한 페트리디쉬 당 20ml을 넣을 것이므로 0.16g을 취하였다. 균을 원액, 10배 희석 액 100배 희석 액을 배양할 것이므로 0.16g 3 개를 취하였다.
②Bacto Agar 0.4g를 전자저울로 덜어냈다.
100ml에 2% 즉 2g이 있는 것이 적당한데 한 페트리디쉬 당 20ml을 넣을 것이 므로 0.4g을 취하였다. 균을 원액, 10배 희석 액 100배 희석 액을 배양할 것이 므로 0.4g 3개를 취하였다.
③삼각플라스크 3개 각각에 덜어낸 NB와 Bacto Agar를 넣고 증류수 20ml을 넣었 다.
④살살 섞어 어느 정도 녹인 후 호일로 입구를 막고 Agar가 굳기 전에 autoclave에 넣어 고압 멸균한 후 45~50℃로 유지시켜 두었다.
⑤배지에 심을 균 준비하기
가게에서 사온 우유(1등급 산록우유)원액을 1ml를 준비했다.
원액100㎕을 멸균된 생리 식염수900㎕에 넣었다.(x10)
원액을 10배 희석시킨 실험액 100㎕를 멸균된 생리 식염수 900㎕에 넣었 다.(x100)
⑥autoclave에서 삼각 플라스크 3개를 꺼내어 상온에서 살살 흔들어 가며 식혔다.⑦Clean bench에서 삼각플라스크의 호일을 벗기고 준비된 균 샘플을 오토피펫으로 섞은 후 100㎕씩 뽑아내어 삼각플라스크에 넣고 잘 흔들어 섞었다.
⑧ 멸균된 1회용 페트리접시3개 뒷면에 조번호와 날짜 균체의 희석정도를 적고 균 이 심어진 굳지 않은 배지 액을 각각 페트리접시에 부어 굳혔다.
⑨완전히 배지가 굳은 다음 저온 배양기에 뒤집은 상태로 넣고 24~48시간(44시간) 배양한 후 관찰했다.

참고 자료

최신 실험 미생물학(신일상사)