항생물질 감수성 시험

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항생물질 감수성 시험

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본문내용

1. 주제 : 항생물질 감수성 시험 (디스크 확산법)
2. 실험도구 : petri dish, disc, 핀셋, 알코올 램프, 멸균 삼각 유리봉, 백금이
3. 사용한 배지 : NA 배지 (Nutrient Agar배지)
4. 사용한 균주 : E. coli, S. aureus
5. 사용한 disc : S 10 (Streptomycin), P 10 (Penicillin), GM 10 (Gentamicin)
TE 30 (Tetracyclin), VA 30 (Vancomycin)
6. 실험방법 :
① 미리 NA배지를 준비해 둔다.
② 준비된 배지에 균 100μL를 넣고 멸균 삼각 유리봉으로 골고루 펴준다.
③ 평판에 균을 접종한 후 적어도 15분 이내에 디스크를 놓아야 한다. (항생물질의 확산과 균의 성장이 동시에 진행되도록 한다.) 가느다란 핀셋을 화염 멸균하고 식힌 후 디스크를 집어 평판 위에 놓고 살짝 누른다. 평판 주변에서 15mm이상 떨어지고 이웃한 디스크를 놓는다. 일단 놓은 디스크는 자리를 움직이지 말아야 한다.
④ petry dish의 밑바닥을 위로 하여 37℃에서 16~20시간 배양한다. 배양 후 생긴 증식 저지환의 크기를 측정한다.

11. 실험에 대한 원리 및 설명

(1) 항생물질 감수성 시험
병원 미생물의 항생물질 감수성을 조사하거나, 미생물에 대한 항생물질의 역가, 순도, 또는 함량을 측정하는 방법으로써, 미생물을 이용한 생물학적 검정법(bioassay)인 확산법 (antibiotic diffusion assay) 이 널리 이용되고 있다. 확산법은 항생물질이 확산되어 생성되는 증식 저지환(growth inhibition zone)의 크기를 비교함으로써 역가를 계산하는 방법으로 원통평판법(cylinder plate assay)와 디스크 확산법(disc diffusion assay)이 있다. 이 외에 앞에서 언급한 액체배지 희석법과 같은 원리를 이용한 탁도법도 있는데, 이는 액체배지 중에 포함되어 있는 항생물질이 양에 따라 성장의 억제 정도가 달라지고, 그에 따라 나타나는 배양액의 탁도의 차이가 나타남에 따라, 이를 비교하여 항생물질의 역가를 계산하는 방법이다.

참고 자료

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