HPLC,인도페놀적정법

목차

1. 고성능액체크로마토그래피(HPLC)
1) HPLC의 구성
2) HPLC에 의한 정량법

2. 2,4-Dinitrophenylhydrazine(DNP)에 의한 정량법
1) 인도페놀적정법에 의한 정량
2) HPLC에 의한 정량법

3. 2,4-Dinitrophenylhydrazine(DNP)에 의한 정량법
1)인도페놀적정법에 의한 정량

본문내용

고성능액체크로마토그래피(HPLC)
당, 유기산, 비타민, 아미노산, 향미물질, 첨가물, 보존제; 위화물(adulterant)등에 걸쳐 거의 모든 물질의 검색과 정량이 가능한 기법으로, 일종의 액체크로마토그래피로서 고압하에서 액체인 이동상이 고정상을 통과하게 되어 있다.
고정상은 “칼럼”이라고 하는 좁은 “천공관(bore tube)"에 들어 있으며, 정상 크로마토그래피에서는 고정상이 아미노기나 시아노기가 결합되어 높은 극성을 나타내는 실리카 겔로고성능액체크로마토그래피(HPLC)

당, 유기산, 비타민, 아미노산, 향미물질, 첨가물, 보존제; 위화물(adulterant)등에 걸쳐 거의 모든 물질의 검색과 정량이 가능한 기법으로, 일종의 액체크로마토그래피로서 고압하에서 액체인 이동상이 고정상을 통과하게 되어 있다.
고정상은 “칼럼”이라고 하는 좁은 “천공관(bore tube)"에 들어 있으며, 정상 크로마토그래피에서는 고정상이 아미노기나 시아노기가 결합되어 높은 극성을 나타내는 실리카 겔로 되어 있고 이동상은 헥산이나 클로로포름과 같은 비극성 물질로 되어 있다. 이 장치에서는 극성물질들이 덜한 물질보다 더 오래 칼럼에 머물게 되어 있으며, 당, 스테로이드, 니트로화합물, 아미노산, 단백질, 펩티드 등이 모두 분석 가능하다. 역상 크로마토그래피에서는 고정상이 비극성물질(특히 C₈-C18 탄화수소)이고 이동상이 극성물질(물, 메탄올, 아세토니트릴 등)로 되어 있어 비극성물질등이 더 오래 칼럼에 머물도록 되어 있다. 아민, 페놀류, 수용성 비타민, 정유 등이 이 방법에 의해 분석 가능하다.
시료 성분의 용출순서는 사각형 안에 표시되어 있는데, 보기로서 역상 크로마토그래피에서는 극성이 높은 물질일수록 먼저 용출된다.
HPLC에서 이동상의 운반시스템에는 isocratic system과 gradient system의 두 가지가 있다. Isocratic system에서는 이동상이 함께 머물고 있어 전 분리시간 중 펌프에 의해 같은 유속으로 흐르게 되어 있다. Gradient system에서는 이동상의 유속과 농도가 분리시간 중 계속 변하게 되어 있는데, 분리 끝 부분에 보다 강한 극성용매가 특히 점착성이 강한 물질을 칼럼에서 분리하게 된다.

참고 자료

없음