미생물의 순수분리 및 관찰

소개글

생명과학실험-보고서입니다
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목차

1. Introduction
2. Materials
3. Methods-Results&Discussion
실험 I. 형태관찰
실험 I에 대한 결과 및 토의
실험 II. Endospore 관찰
실험 II에 대한 결과 및 토의
실험 III& IV Gram staining / KOH test / Catalase / Oxidase
실험 III& IV에 대한 결과 및 토의
실험 V. 미생물의 Malachite green 분해능
실험 V에 대한 결과 및 토의
실험 VI. mixture로부터의 순수분리
실험 VI에 대한 결과 및 토의
실험 VII. 환경sample로부터의 미생물 분리
실험 VII에 대한 결과 및 토의

본문내용

그람염색: 분별염색 기법
분별염색(differential staining)은 세균의 식별을 용이하게 하기 위하여 2가지 이상의 생물학적 염료(biological dye)를 사용하는 염색방법이다. 분별염색 기법은 또한 특별한 세포구조물을 염색하기 위해 사용될 수 있다. 이 염색방법은 세포의 형태와 세포배열과 같은 특성의 관찰을 용이하게 하여 세포의 시각화를 증진시킬 뿐만 아니라 기타 특이한 정보도 제공한다. 미생물학에서 가장 보편적으로 사용되는 분별염색 방법은 Gram 염색으로 대부분의 세균세포에서 염색결과는 Gram 양성이나 Gram 음성으로 나타난다. 이 염색방법은 1884년 덴마크의 내과의사 Christian Gram에 의해 처음 발견되었다. Gram 염색반응은 세균 동정을 할 때 제일 먼저 확인하는 특징 중의 하나로서 중요한 의미를 가진다.

Gram 염색은 처음에 개발된 방법으로부터 많은 변화가 이루어졌으며 실험실에 따라서도 조금씩 차이가 있을 수 있다. Gram 요오드 용액의 요오드는 매염제로서 작용하며 crystal violet과 함께 화학적 복합체(CVI complex)를 형성 한다. 매염제는 염료(crystal violet)에 의해 염색된 세포들에 대하여 친화력을 증진시킨다. 물은 과량의 Gram 요오드 용액을 씻어내는데, 이 시점에서 모든 세포는 자주색(purple)으로 염색된다. 다음으로 사용되는 시약은 탈색제인 acetone-alcohol이며 세균의 세포벽에 존재하는 지방질을 용해시켜 CVI복합체를 떨어져 나가게 한다. 탈색된 세포들은 염색되지 않았거나 또는 무색으로 세포벽 내에서 지방질이 매우 적거나 또는 완전히 제거되며, CVI 복합체가 남아 있는 세균은 보라색을 유지하게 된다. 탈색을 확인하기 위하여 다음단계로서 역염색(counter staining)을 하는데 염료는 safranin이 사용된다.

참고 자료

없음