plasmid 추출법

소개글

플라스미드 추출법

목차

1) 기본원리
2) 필요한 장비
3) 필요한 시약
4) 필요한 용액 만들기
5) 필요한 배지 만들기
6) 실험 방법

본문내용

1. Plasmid 추출
1) 기본원리
(1)Plasmid DNA의 구조
(2)알칼리 변성(Alkali법)
2) 필요한 장비
3) 필요한 시약
(3)시약제조법
※ 몰농도라는 것은 용액 1000ml속에 들어있는 물질의 몰수를 말합니다.
여기에 1몰은 분자량에 g을 붙인 값이다. 100㎖를 기준으로 정리하였음
※ 용액의 농도를 나타내는 방법의 하나로 용액 1ℓ 속에 녹아 있는 용질의 g당량수를 나타낸 농도를 말한다.
※ 당량의 개념
①원소의 당량: 산소의 1/2 g원자(8.000 g)와 화합하는 다른 원소의 양을 x g이라 할 때,
x를 그 원소의 당량이라고 한다. 직접 산소와 화합하지 않는 원소인 경우는 산소와
화합하는 다른 원소를 중개하여 정할 수 있다. 원소의 원자량과 당량의 비는 그 원소의 원자가(原子價)와 같아지므로 다음과 같다.
※ 필요한 기구 : 메스실린더, 비커, 교반기(stirrer), Magnetic Bar
-50 mM glucose (dextrose 180.61g)
•몰농도 식에 의해서 glucose가 50 mM 되게 하려면 glucose 0.9 g 필요
•증류수에 glucose 0.9g을 녹인 후 최종 100㎖로 용량을 맞춘다.
-25 mM Tris․HCl (pH8.0)
•몰농도 식에 의해서 Tris․HCl 25mM 되게 하려면 0.3 g 필요
-10 mM EDTA(ETHYLENEDIAMINETETRAACETIC ACID) (pH 8.0)
•몰농도 식에 의해서 EDTA 10 mM 되게 하려면 3.722 g 필요
•증류수에 EDTA 3.722 g을 녹인 후 최종 100㎖로 용량을 맞춘다.
-NaOH/SDS solution (실험할 때 마다 만들어서 사용)
-5 M Potassium acetate solution(CH3COOK, FW 98.15), pH 4.8
-TE buffer
4) 필요한 용액 만들기
5) 필요한 배지 만들기
6) 실험 방법

참고 자료

유전자클로닝 입문