[자연과학]E.coli 생화학적 실험

소개글

E.coli의 생화학적 실험 레포트
TSI/S test
LIM test
Lactose utilization test

목차

Ⅰ. Introduction
1.실험목적
2.실험원리

Ⅱ. Materials & Methods
1.실험재료
2.실험방법

Ⅲ. Results

Ⅳ. Discussion

Ⅴ. Conclusion

Ⅵ. References

본문내용

2. 실험원리
TSI/S test에 사용하는 배지는 사면배지로, 이 배지는 glucose와 lactose의 이용능과 H2S 생산능, gas의 생산능을 한 번에 관찰 할 수 있는 장내세균 감별에 매우 유용한 배지이다. 이 배지의 특징은 그 조성의 포도당과 젖당의 비율(1:10)에 있다. 장내균은 일반적으로 포도당을 선호하므로 우선 배지내의 포도당을 이용하여 산을 생성하게 된다. 이때 또한 질소원으로써 polypeptone을 사용하여 NH3을 생산하며 공기와 접촉하는 사면 부위는 공기에 의하여 산화되고 당을 발효하는 것보다 당을 이용하여 에너지원 및 세포조성 물질을 만드는데 이용된다. 이때 젖당을 이용하지 않는 세균은 배지 내 포도당 양이 적으므로 포도당이 빨리 소모된다. 이런 경우에 배지의 형태를 보면 사면 부위는 산화와 NH3에 의하여 알칼리화하며 색의 변화가 없거나 붉은 색을 나타내며, 배지의 밑부분은 발효에 의하여 산이 생성되어 산성화되고 색은 노란색으로 변한다. 그러나 젖당을 이용할 수 있는 세균은 포도당보다 10배나 많은 젖당을 이용하여 계속하여 산을 생성하여 배지 전체를 산성화시켜 노란색으로 변화시킨다. 또한 배지내의 Na2S2O3를 이용하여 H2S를 생성하며 이는 배지내의 철과 결합하여 검은색의 침전을 보인다. 그리고 가스를 생성하는 세균이 당을 이용하여 개미산(Formic acid)을 생성하고 이로부터 CO2와 H2가스를 발생시켜 배지가 갈라지는 현상을 보인다. E.coli 는 배지 전체를 노란색으로 변하게 만들고, 시험관 밑쪽에 가스를 생성한다.
LIM test는 세균이 lysine Decarboxylase, lysine decaminase와 indole을 생성하는 지와 운동성 여부를 판별하기 위한 실험이다. lysine분해능이 양성이면 보라색 또는 청포도색이고, 음성이면 노란색을 띤다. Indole생성능은 시약을 떨어뜨렸을 때 양성을 붉은색, 음성을 노란색이 나타나는 것으로 알 수 있다. 운동성은 균이 자란 흔적이나 움직인 흔적이 보이면 양성이다. E.coli 는 lysine분해능과 Indole생성능과 운동성이 모두 양성이다.
Lactose utilization test는 Lactose를 이용하여 듀람관 안에 gas의 생성여부를 확인하는 실험으로 gas가 생성되면 E.coli 라고 판정할 수 있다.

참고 자료

1. 자연의 지배자들/이재열/지호/1999년 발행
2. http://cafe.naver.com/sehoseafood.cafe?iframe_url=/ArticleRead.nhn%3Farticleid=73
3. http://blog.naver.com/enus01?Redirect=Log&logNo
4. http://blog.naver.com/flyday75?Redirect=Log&logNo=9067789