유전자클로닝과 PCR

소개글

유전자 클로닝과 PCR의 영향에 대해 소개햇습니다..많은 도움 되시길 바랍니다.

목차

유전자 클로닝과 PCR의 출현
The polymerase chain reaction
PCR 소개
PCR증폭 효율에 영향을 미치는 요인
PCR의 방법과 종류 및 실험 자료
1. The polymerase chain reaction in outline
2. PCR in more detail
식물재료의 살균과 무균조작
Vector
1) 플라스미드 벡터
2) 파아지 벡터
3) 람다 파아지 벡터
4) 코스미드(Cosmid)
5) M13파아지 벡터
6) 파아지미드(Phagemid)

본문내용

현재는 거의 고유 명사화 된 PCR은 polymerase chain reaction의 약자로 우리말로는 중합효소연쇄반응이라고 풀이할 수 있는데 그는 `어떤 DNA의 특정부위의 양끝에 있는 sequence를 서로 상보적인 strand로 합성해 만든 primer와 원래의 original DNA (template) 넣은 뒤 적정 조건에서 DNA polymerase를 넣어주고 합성을 한 뒤 온도를 올려 합성된 double strand를 single strand로 풀고 다시 primer와 DNA polymerase를 첨가하는 반응을 되풀이 하면 매 cycle마다 target으로 하는 DNA가 2배씩 증폭이 될 것이 아닌가..`라는 생각을 하였고 다음날 떨리는 마음으로 회사의 실험실에 돌아와 해보니 진짜 되더라는 것이다. 결국 1993년 Dr. Kary Mullis는 과학계의 발전에 도움을 준 아이디어를 높이 평가받아 화학 분야에서 Novel상을 받았다. 간단했지만 획기적 이였던 idea의 Dr. Mullis이외에 PCR의 탄생에 결정적 산파 역을 한 또 한 사람은 Dr. Saiki이다. 원래 PCR에 사용되었던 polymerase는 E.coli의 DNA polymerase I 인 Klneow fragment 였는데 이는 DNA를 single strand로 풀기 위해 온도를 올리면 파괴가 되어버리기 때문에 매 cycle마다 enzyme을 다시 넣어 줘야 했었다. Saiki등은 Thermus aquaticus라는 온천에 사는 미생물에서 추출한 polymerase를 DNA polymerase I 대신에 사용하였다. 이 미생물은 섭씨 72도의 고온에서 생존하므로 그 polymerase역시 72도 이상의 고온에서 파괴되지 않고 활성을 잃지 않을 것이라는 예리한 자연현상의 관찰에서 나온 발견이었다.

참고 자료

없음