Gram Staining

소개글

Gram Staining을 통하여, Gram-positive균과 Gram-negative균을 구분할 수 있어야 하며, Gram Staining의 원리와 방법을 이해한다.

목차

실험제목
실험목적
이론및 원리
Materials
실험방법

본문내용

1. 실험 제목: Gram Staining
2. 실험 목적: Gram Staining을 통하여, Gram-positive균과 Gram-negative균을 구분할 수 있어야 하며, Gram Staining의 원리와 방법을 이해한다.
3. 이론 및 원리: Gram Staining은 감별염색법으로 1884년 Hans Christian Gram에 의해서 처음으로 개발된 방법이다. 박테리아의 분류에서 가장 널리 이용되는 방법으로. 오늘날에는 시약의 조성 및 처리 시간을 달리한 변형 방법이 개발되었으나, 기본적으로 방법은 동일하다. 이는 비교적 간편한 방법으로 미생물에 의한 감염 여부를 조기에 진단할 수 있게 해준다.
Gram Staining은 각 세균의 세포벽을 이루고 있는 성분과 구조에 따라 다르게 나타나는데 양성세균과 음성세균은 전기적 성질과는 무관하며 단순히 형태학적 차이를 나타내는 용어이다. 양성과 음성이 서로 다르게 염색되는 것은 근본적으로 세포벽 구조가 다르기 때문이다. 양성세균의 경우 세포벽의 약 80~90%가 peptidoglycan layer으로 두껍게 감싸고 있는 반면, 음성 세균의 경우 세포벽의 10~20%만이 한겹의 peptidoglycan layer으로 매우 얇다. 이러한 세포벽 구조의 차이는 세균을 분류하는 가장 기본적인 기준이 되었는데, 이들의 Gram Staining 결과는 다음과 같다.
그람 양성세균의 경우 세포벽이 두꺼운 peptidoglycan layer와 풍부한 teicoic acid라는 다당류로 이루어져 있어서 organic decolorizer(탈색제)로 탈색 시 쉽게 탈색되지 않는다. 이는 탈색제가 여러 층의 peptidoglycan layer을 탈수시켜 분자간의 공간을 좁히기 때문에 crystal violet이 세포 밖으로 빠져나오지 못하는 것이다. 따라서 염색액 crystal violet이 계속 세균 내에 남아있어 청색 또는 보라색이 그대로 남는다.

참고 자료

1. 그림1,그림2: http://hankukm.com.ne.kr/
2. 실험 방법 사진: http://www.ncl.ac.uk/dental/oralbiol
3. ‘화공생명기초실험’ 책자
4. Reagents: http://blog.naver.com/juelf
5. 이론 및 원리: Naver 지식iN 오픈백과 사전 , Naver 개인 블로그 (부분 참조)
6. http://www.ncl.ac.uk/dental/oralbiol/oralenv/tutorials/gramstain.htm