[생명공학]PCR실험,Preparation of chromosomal DNA, DNA재조합 실험보고서..

소개글

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목차

Subject : General PCR
Subject Preparation of chromosomal DNA
Subject Small-scale Preparations of Plasmid DNA
Subject Enzyme treatment
Subject Ligation and Transformation

본문내용

inseertion site가 항생제 저항 유전자의 가운데에 위치하는 경우에는 원하는 유전자의 플라스미드 내 삽입이 안전하게 되면 항생제 저항 유전자 가 갈라지기 때문에 그 활성을 할수 가 없게 되어, 항생제 첨가 배지에서 죽게 된다. 이런 식으로도 selection이 가능합니다. 플라스미드는 필요에 따라서 인공적으로 생산되기도 합니다. 원활한 selection을 위해서 다른 유전자를 집어넣거나 하는것 등이다.

유전적으로 꼭 같은 세포군이나 개체군을 클론(clone)이라고 하며 동식물의 한 개체에서 수정을 거치지 않고, 무성 생식에 의해 양친과 똑같은 유전자 형질을 가진 또다른 개체를 얻는 행위나 방법을 말한다. 즉 수컷, 암컷의 수정에 의하지 않고 한쪽의 어버이로부터 유전자를 그대로 받은 자식을 만들 수 있다. 예컨대 대장균과 같은 세포는 분열이라는 무성생식으로 번식하므로 당연히 클로닝으로 증식한다고 말할 수 있다.

DNA 클로닝: 공여체 DNA를 다량 복제하는 것

DNA 재조합 과정
ㄱ. 플라스미드를 대장균에서 분리한다.
ㄴ. 같은 제한효소를 사용하여 공여체 DNA와 플라스미드를 끊는다.
ㄷ. DNA 리가아제로 두 DNA를 연결하여 재조합 DNA를 얻는다.
ㄹ. 재조합 DNA를 플라스미드를 갖지 않은 대장균에 삽입한다.
ㅁ. 재조합 DNA를 가진 대장균 수가 증가되면서 재조합 DNA도 복제되어 공여

참고 자료

없음