HPLC-액체크로마토그래피를 이용한 카페인의 정량

소개글

HPLC(High Performance Liquid Chromatography)를 이용해 Adenine, Caffeine의 구조와 Retention time과의 관계를 알아보고, 커피 한 잔에 포함된 Caffeine을 정량해 본다. 이를 위해 최대흡광파장을 찾아낸 후 Beer`s Law를 사용하여 커피의 크로마토그램을 통해 Caffeine을 정량한다.

목차

1.Abstract
2.Introduction
3.Procedure
4.Data&Result
5.Discussion
6.Reference
*과제

본문내용

1. Abstract
HPLC(High Performance Liquid Chromatography)를 이용해 Adenine, Caffeine의 구조와 Retention time과의 관계를 알아보고, 커피 한 잔에 포함된 Caffeine을 정량해 본다. 이를 위해 최대흡광파장을 찾아낸 후 Beer`s Law를 사용하여 커피의 크로마토그램을 통해 Caffeine을 정량한다.
2. Introduction
분리에 가장 광범위하게 이용되는 크로마토그래피의 핵심은 극성은 극성끼리, 비극성은 비극성끼리 잘 섞인다는 점이다. 크로마토그래피에서는 고정상과 이동상의 극성이 크게 다르면 분리하고자 하는 물질이 두 상에 다르게 분배되는 원리를 이용한다. 크로마토그래피는 고정상, 이동상으로 어떤 물질은 사용하는냐에 따라 정상, 역상 크로마토그래피로 구분된다. 정상 크로마토그래피는 극성이 높은 물질(종이, Silica gel 등)을 고정상으로, 극성이 낮은 유기용매를 이동상으로 사용한다. 반면에 고정상으로 극성이 낮은 탄화수소(C18 또는 C8)을, 이동상으로 극성이 높은 수용액을 사용하는 방법을 역상크로마토그래피라 한다. 정상 크로마토그래피의 경우 먼저 나오는 것의 극성이 크고, 나중에 나오는 것일수록 극성이 작다. 극성이 작은 물질이 이동상에 친화도가 커서 이동상을 따라 먼저 나오는 것이다. 반대로 극성이 큰 물질은 고정상과의 친화력이 크고 이동상과의 친화력이 작기 때문에 이동상을 따라 많이 이동하지 않고 머물러 있게 되는 것이다.
이와 반대의 결과를 보여주는 것이 역상 크로마토그래피이다. 우리는 옥타데실(C18)을 고정상으로 이용하는 역상 크로마토그래피를 수행한다.
역상 크로마토그래피의 장점으로는 사용할 수 있는 용매가 많으며, 화학 결합의 표면 에너지가 적은 것이 많기 때문에 분석이 빠르며, 용매 교환 시에도 재 평형 시간이 빠른 것을 들 수 있다.

참고 자료

없음