[분석실험] TLC, GPC (Thin Layer Chromatography, Gel Permeation Chromatography)

소개글

1. 실험목적
Thin-Layer Chromatography 와 Gel Permeation Chromatography는 다른 크로마토그래피와는 달리 이동상 및 고정상간의 상호작용이 없이 오직 분리하고자 하는 물질의 크기(분자량)에 의해 분리 된다. 이러한 TLC 와 GPC의 특성을 이용하여 시료를 분자량에 따라 분리되는 것을 확인해 보고 각 실험 방법의 원리와 장단점을 확실히 알도록 한다.

목차

1. 실험목적
2. 실험방법
3. 실험결과
4. Discussion
# GPC의 장단점
# TLC 의 장점
5. Reference

본문내용

2. 실험방법

(1) Thin-Layer Chromatography
① TLC Plate를 적당한 크기로 자른다.
② sample를 spotting 할 곳을 연필로 표시 한다. (6곳)
③ Oven에서 110℃로 30분간 Plate를 activation 한다.
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(2) Gel Permeation Chromatography
①Gel의 준비
- Buffer A ( 0.1M KCL, 0.01M Tris, pH7 )를 조제한다.
- Sephadex G-25를 유리막대로 잘 저으면서 buffer A에 넣는다.
- 2시간 동안 정치한다.
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4. Discussion
이번 실험은 Thin-Layer Chromatography 와 Gel Permeation Chromatography를 이용해서 시료를 분자량에 의해 분리하는 것이다.
TLC는 깨끗한 유리판 위에 흡착제 알맹이의 층을 만들어 용제증기를 포화시킨 공기중에 세우고 한 끝을 용매속에 담가 모세관현상으로 용제를 위쪽으로 이동시키면 판 아래쪽에 부착시켜 놓았던 시료는 흡착제를 정지상, 용제를 이동상으로 해서 혼합성분이 크로마토그래프적으로 전개되어 분리시키는 것을 원리로 하는 분리방법이다.

참고 자료

1. DAVID L. NELSON 저 백형환 번역, 레닌저 생화학, 월드사이언스, 2006, pp90~91
2. http://user.dankook.ac.kr/~enerdine/gpc.htm
3. 대한화학회, 표준 일반화학실험 (제 6개정판), 천문각, 2005, pp.74~83
4. 식품분석실험 프로토콜