Study of the properties of β-galactosidase

소개글

생화학관련 실험으로써 inhibitor의 유무에 따른 Km과 Vmax값의 변화와 substrate의 농도 변화에 따른 반응속도의 변화를 통해 Michaelis-Menten equation을 확인해 본다.
β-galactoside를 가수 분해하는 효소인 β-galactosidase를 이용하여 enzyme kinetics에 관한 실험으로 Vmax와 Km을 구하는 실험이다.

목차

1. Astract
2. Introduction
2-1.Michaelis-Menten equation
2-2.Inhibition
2-3.분광광도법 - Lambert-Beer의 법칙
3. Material and Methods
4. Data and Result
5. Discussion

본문내용

Abstract

이번 실험은 inhibitor의 유무에 따른 Km과 Vmax값의 변화와 substrate의 농도 변화에 따른 반응속도의 변화를 통해 Michaelis-Menten equation을 확인해 보았다. substrate에는 ONPG를, inhibitor로는 lactose를 사용하였고 Enzyme으로는 ONPG와 lactose를 각각 가수분해하는 β-galactosidase와 E.coli를 원심분리하여 추출한 Cell free extract를 사용하여 흡광도를 측정하고, 측정된 결과를 분석하였다. 분석하는 관정에서는 Michaelis-Menten equation과 이의 이중 역수 plot은 Lineweaver-Burk equation, Beer의 법칙을 사용하였고, 분석결과 위 실험은 Vmax값은 일정하고 Km값은 증가하는 competitive inhibition<경쟁적 저해>임을 알 수 있었다.

Introduction

Michaelis-Menten equation
효소의 반응속도는 보통의 화학속도와는 다른 점이 있다. S(기질) → P(생성물)이라고 하는 화학반응에서 촉매가 없는 경우에는 P가 되는 속도는 S의 양에 비례하므로 반응속도와 S의 농도그래프는 직선이 된다. 그러나 효소가 촉매로서 작용하면 이 그래프는 직선이 되지 않는다. S의 농도가 증가하면 반응속도도 증가하지만 이 경우에는 점점 증가하여 어느 점에서 다시 감소하게 된다. 이 곡선에 대응하는 방정식을 Michaelis-Menten equation이라고 한다. 이 곡선은 직각 쌍곡선의 일부로서 반응이 진행되지 않는 선이 점근선이다.

참고 자료

Marry K. Campbell(김재호역), 생물화학 1st, 2001년, 청문각 pp252~253, p380
Nelson.Cox, Lehninger 생화학 (상) 4판, 2002년 (주)서울 외국서적 pp261~267