여러가지 단백질 분석법의 장,단점

소개글

단백질 분석 시
Biuret method
Lowry method
Ultraviolet(UV) method
Dye binding method(Bradford method)
Ninhyndrin method
의 장, 단점

목차

1.Biuret method
2.Lowry method
3.Ultraviolet(UV) method
4.Dye binding method(Bradford method)
5.Ninhyndrin method

본문내용

1. Biuret method

● 장점
- Kjeldahl 법 보다 덜 비싸다: 빠르다 (30분 이내로 끝낼 수 있다) & 간편하다
- Lowry 법이나 UV absorption 법 보다 색의 변화량이 적다.
- peptide 나 protein가 아닌 물질에서 나온 nitrogen 은 검출할 수 없다.

● 단점
- Lowry 법에 비해 감도가 매우 떨어진다 : 분석을 위해선 최소 2~4mg의 protein이 요구 된다.
- 고농도의 암모늄 염, DNA, 지질과 환원당 은 반응을 방해한다.
- 만약 고차원의 지질 또는 탄수화물이 존재할 경우, 단백광은 마지막 용해 시에 나타날 수 있다.
- 각기 다른 단백질들은 색의 차이가 있다 : 젤라틴은 홍-적색을 띈다.
- 절대적 방법이 아니다 : 색은 알려진 단백질이나 Kjeldahl에 대하여 표준화되어야 한다.

2. Lowry method

● 장점
- 매우 감도가 우수하다.
(Biuret 법은 50~100회, UV absorption 법은 10~20회, Ninhydrin 법은 수 회)
- 비교적 간단하다 : 1˜1.5시간 안에 할 수 있다.

● 단점
- 다른 단백질 간의 색의 차이가 Biuret 법 보다 훨씬 더 광범위 하다.
- 단백질 농도에 색은 엄격히 비례하지 않는다.
- sucrose, 지질, phosphate buffer, 단당류, ,hexoamines, 고농도의 환원당, 암모늄sulfate, 그리고 sulfhydryl 화합물은 반응에 방해가 된다.

참고 자료

없음